Preskoči na vsebino
U-118 MG
Tkivo
Možgani
Bolezen
Astrocitom
Mesto metastaze
Ne velja (primarni intrakranialni tumor; brez oddaljenih metastaz)
Sinonimi
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Dokumenti

U-118 MG

Cell line · Številka izdelka 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis
To je ena od številnih celičnih linij, pridobljenih iz malignih gliomov (glej tudi U-87 MG, U-138 MG in U-373 MG), ki jih je J. Ponten s sodelavci pridobil v letih 1966-1969.
Tkivo
Možgani
Bolezen
Astrocitom
Mesto metastaze
Ne velja (primarni intrakranialni tumor; brez oddaljenih metastaz)
Uporaba
Raziskave glioblastoma/astrocitoma; biologija glialnih tumorjev; občutljivost na sevanje; ocena kemoterapije (temozolomid, CCNU); analiza poti EGFR; signalizacija NF-κB; predklinično modeliranje tumorjev centralnega živčnega sistema
Sinonimi
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
Brez gensko spremenjenih organizmov
Podrobnosti o statusu GSO
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Mešani
Vrsta celice
Glijske celice (astrociti)
Tumorigeničen
Da, na golih miših
Kariotip
Linija ima skoraj pentaploidno število kromosomov in širok razpon porazdelitve števila kromosomov (40 % celic je imelo število od 110 do 115). V večini metafaz je bilo najdenih naslednjih 14 označevalcev: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 in t(10q,22q), 6 jih je bilo najdenih v nekaterih, 10 pa le v eni. Normalni kromosomi 7, 8, 12, 19, 20 in 22 so imeli 5 do 6 kopij na celico, x je imel dve kopiji, Y pa ni bilo.
Čas podvojitve
približno 36 do 48 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
U-118 MG (kataloška številka Cytion 300362)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Krvna skupina A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Izoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0001

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite po ploščah v gostoti 5 × 10⁴ celic/cm² in jim pred prvo zamenjavo gojišča pustite vsaj 24 ur časa za prirast.
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 50 % osnovno gojišče + 40 % FBS + 10 % DMSO ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
47 let
Etnična pripadnost
Kavkaški