Ir diretamente para o conteúdo
U-118 MG
Tecido
Cérebro
Doença
Astrocitoma
Local da metástase
Não aplicável (tumor intracraniano primário; sem metástases à distância)
Sinónimos
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Documentos

U-118 MG

Cell line · Número do produto 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição
Esta é uma de várias linhas celulares derivadas de gliomas malignos (ver também U-87 MG, U-138 MG e U-373 MG) por J. Ponten e colaboradores de 1966 a 1969.
Tecido
Cérebro
Doença
Astrocitoma
Local da metástase
Não aplicável (tumor intracraniano primário; sem metástases à distância)
Aplicações
Investigação sobre glioblastoma/astrocitoma; biologia dos tumores gliais; sensibilidade à radiação; avaliação da quimioterapia (temozolomida, CCNU); análise da via do EGFR; sinalização do NF-κB; modelação pré-clínica de tumores do SNC
Sinónimos
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Misto
Tipo de célula
Células gliais (astrocíticas)
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus
Cariótipo
A linha tem um número cromossómico quase pentaplóide e uma vasta gama de distribuição do número cromossómico (40% das células tinham números que variavam entre 110 e 115). Os 14 marcadores seguintes foram encontrados na maioria das metáfases: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 e t(10q,22q), 6 destes foram encontrados em algumas células e 10 foram observados apenas numa. Os cromossomas normais 7, 8, 12, 19, 20 e 22 tinham 5 a 6 cópias por célula, o x tinha duas cópias e o Y estava ausente.
Tempo de duplicação
aprox. 36 a 48 horas

04Identificadores

Referência
U-118 MG (número de catálogo Cytion 300362)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Tipo de sangue A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Isoenzimas
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Produto de frequência fenotípica: 0.0001

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
2 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após a descongelação, semeie as células a uma densidade de 5 × 10⁴ células/cm² e aguarde pelo menos 24 horas para que adiram antes da primeira troca de meio.
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
47 anos
Etnia
Caucasiano