Siirry sisältöön
U-118 MG
Kudos
Aivot
Sairaus
Astrosytooma
Metastaasikohde
Ei sovelleta (primaarinen kallonsisäinen kasvain; ei etäpesäkkeitä)
Synonyymit
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Asiakirjat

U-118 MG

Cell line · Tuotenumero 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
Tämä on yksi useista solulinjoista, jotka J. Ponten ja kumppanit ovat saaneet pahanlaatuisista glioomista (ks. myös U-87 MG, U-138 MG ja U-373 MG) vuosina 1966-1969.
Kudos
Aivot
Sairaus
Astrosytooma
Metastaasikohde
Ei sovelleta (primaarinen kallonsisäinen kasvain; ei etäpesäkkeitä)
Sovellukset
Glioblastooman/astrosytooman tutkimus; glia-kasvainten biologia; säteilyherkkyys; kemoterapian arviointi (temotsolomidi, CCNU); EGFR-signalointireitin analyysi; NF-κB-signalointi; keskushermoston kasvainten prekliininen mallintaminen
Synonyymit
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Mixed
Solutyyppi
Glia-solut (astrocytit)
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä
Karyotyyppi
Linjalla on lähes pentaploidinen kromosomiluku ja laaja kromosomilukujen jakauma (40 prosentilla soluista kromosomiluvut vaihtelivat 110-115 välillä). Seuraavat 14 merkkiainetta löytyivät useimmista metafaaseista: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 ja t(10q,22q), näistä 6 löytyi joistakin ja 10 vain yhdestä. Normaaleissa kromosomeissa 7, 8, 12, 19, 20 ja 22 oli 5-6 kopiota solua kohti, x:llä oli kaksi kopiota ja Y puuttui.
Kaksinkertaistumisaika
noin 36–48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
U-118 MG (Cytionin luettelonumero 300362)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Isoentsyymit
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0001

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulatuksen jälkeen solut siirretään viljelyastioihin tiheydellä 5 × 10⁴ solua/cm² ja annetaan niiden kiinnittyä vähintään 24 tuntia ennen ensimmäistä elatusaineen vaihtoa.
Sulatus ja viljely

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme 50 % perusmediaa + 40 % FBS + 10 % DMSO:ta eli CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytysstressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
47 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen