Přejít na obsah
U-118 MG
Tkáň
Mozek
Nemoc
Astrocytom
Místo metastázy
Nevztahuje se (primární intrakraniální nádor; bez vzdálených metastáz)
Synonyma
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Dokumenty

U-118 MG

Cell line · Číslo výrobku 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis
Jedná se o jednu z řady buněčných linií odvozených z maligních gliomů (viz také U-87 MG, U-138 MG a U-373 MG) J. Pontenem a jeho spolupracovníky v letech 1966-1969.
Tkáň
Mozek
Nemoc
Astrocytom
Místo metastázy
Nevztahuje se (primární intrakraniální nádor; bez vzdálených metastáz)
Aplikace
Výzkum glioblastomu/astrocytomu; biologie gliových nádorů; citlivost na záření; hodnocení chemoterapie (temozolomid, CCNU); analýza signální dráhy EGFR; signalizace NF-κB; preklinické modelování nádorů centrálního nervového systému
Synonyma
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Smíšené
Typ buňky
Gliové buňky (astrocytární)
Tumorogenní
Ano, u nahých myší
Karyotyp
Linie má téměř pentaploidní počet chromozomů a široký rozsah rozložení počtu chromozomů (40 % buněk mělo počet chromozomů v rozmezí 110 až 115). Ve většině metafází bylo nalezeno následujících 14 markerů: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 a t(10q,22q), 6 z nich bylo nalezeno v některých a 10 bylo pozorováno pouze v jedné. Normální chromozomy 7, 8, 12, 19, 20 a 22 měly 5 až 6 kopií na buňku, x měl dvě kopie a Y chyběl.
Doba zdvojnásobení
přibližně 36 až 48 hodin

04Identifikátory

Citace
U-118 MG (katalogové číslo Cytion 300362)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Krevní skupina A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Isoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, produkt fenotypové frekvence: 0.0001

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky na kultivační misky v hustotě 5 × 10⁴ buněk/cm² a před první výměnou média počkejte alespoň 24 hodin, aby se buňky přichytily.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 50% základní médium + 40% FBS + 10% DMSO nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
47 let
Etnická příslušnost
Kavkazský