Ga naar de inhoud
U-118 MG
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Astrocytoom
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (primaire intracraniële tumor; geen metastasen op afstand)
Synoniemen
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Documenten

U-118 MG

Cell line · Productnummer 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving
Dit is een van een aantal cellijnen afgeleid van kwaadaardige gliomen (zie ook U-87 MG, U-138 MG en U-373 MG) door J. Ponten en medewerkers van 1966 tot 1969.
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Astrocytoom
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (primaire intracraniële tumor; geen metastasen op afstand)
Toepassingen
Onderzoek naar glioblastoom/astrocytoom; biologie van gliale tumoren; stralingsgevoeligheid; evaluatie van chemotherapie (temozolomide, CCNU); analyse van de EGFR-route; NF-κB-signalering; preklinische modellering van tumoren in het centrale zenuwstelsel
Synoniemen
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
Zonder genetisch gemodificeerde organismen
Details over de GGO-status
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Gemengd
Celtype
Glia-cellen (astrocyten)
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen
Karyotype
De lijn heeft een bijna pentaploïd chromosoomnummer en een brede verdeling van chromosoomnummers (40% van de cellen had aantallen variërend van 110 tot 115). De volgende 14 markers werden in de meeste metafasen gevonden: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 en t(10q,22q), 6 hiervan werden in enkele gevonden en 10 werden slechts in één gezien. Normale chromosomen 7, 8, 12, 19, 20 en 22 hadden 5 tot 6 kopieën per cel, de x had twee kopieën en de Y was afwezig.
Verdubbelingstijd
ongeveer 36 tot 48 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
U-118 MG (Cytion catalogusnummer 300362)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Bloedgroep A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Iso-enzymen
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotype Frequentie Product: 0.0001

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
2 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Breng de cellen na het ontdooien uit op een celkweekplaat met een dichtheid van 5 × 10⁴ cellen/cm² en laat ze ten minste 24 uur hechten voordat u het medium voor het eerst vervangt.
Ontdooien en kweken

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
47 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch