Ga naar de inhoud
DSL-6A-C1
Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Carcinoom, azaserine geïnduceerd
Plaats van uitzaaiingen
Ductaal
Synoniemen
DSL-6A/C1, DSL6A/C1

Documenten

DSL-6A-C1

Cell line · Productnummer 500166

The DSL-6A/C1 cell line is a pancreatic ductal cell line originally derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma, a tumor established from ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De DSL-6A/C1-cellijn is een pancreas ductale cellijn die oorspronkelijk is afgeleid van het DSL-6 transplanteerbaar acinair celcarcinoom, een tumor die is ontstaan uit een primair acinair celcarcinoom van de pancreas in een mannelijke Lewis rat. Deze rat werd intraperitoneaal blootgesteld aan azaserine, wat leidde tot de ontwikkeling van de tumor. In eerste instantie, na vestiging in kweek, behielden DSL-6A/C1 cellen het vermogen om amylase te produceren, een karakteristiek exocrien enzym van acinare cellen. Deze productie stopte echter binnen één tot twee weken na de kweek.

Na verloop van tijd, toen de DSL-6A/C1 cellen in kweek werden gehouden en onderworpen werden aan regrafting experimenten, ondergingen ze een opmerkelijke fenotypische transformatie. De cellen verloren structurele en immunohistochemische markers die typerend zijn voor acinare cellen en begonnen in plaats daarvan markers tot expressie te brengen die indicatief zijn voor het fenotype van ductale cellen. Een van de belangrijkste markers die tijdens deze transformatie werd verkregen is de cystic fibrosis transmembrane regulator (CFTR), die gewoonlijk geassocieerd wordt met ductale cellen in de alvleesklier. Deze verschuiving in markerexpressie suggereert een aanzienlijke plasticiteit in de cellijn, die veranderingen in celidentiteit en -functie weerspiegelt die kunnen optreden als reactie op de in vitro omgeving.

Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Carcinoom, azaserine geïnduceerd
Plaats van uitzaaiingen
Ductaal
Synoniemen
  • DSL-6A/C1
  • DSL6A/C1

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Acinare cellen
Tumorverwekkend
Ja, in Lewis ratten produceren de cellen vaste tumoren die bestaan uit kanaalachtige structuren omgeven door dicht vezelig weefsel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
DSL-6A-C1 (Cytion catalogusnummer 500166)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_4166

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
Waymouth medium (Wij leveren dit product niet; overweeg andere leveranciers. Laat het ons weten als je meer hulp nodig hebt)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 2,0 mM L-glutamine
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
Lewis
Leeftijd van de donor
2 jaar