Mine otse sisu juurde
DSL-6A-C1
Kude
Pankreas
Haigus
Kartsinoom, asaseriini indutseeritud
Metastaaside asukoht
Ductal
Sünonüümid
DSL-6A/C1, DSL6A/C1

Dokumendid

DSL-6A-C1

Cell line · Toote number 500166

The DSL-6A/C1 cell line is a pancreatic ductal cell line originally derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma, a tumor established from ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

DSL-6A/C1 rakuliin on pankrease ductuse rakuliin, mis on algselt saadud DSL-6 transplanteeritavast atsinarakkude kartsinoomist, mis on saadud isase Lewis'i roti primaarsest atsinarakkude kartsinoomist. See rott sai intraperitoneaalselt asaseriini, mis viis kasvaja tekkimiseni. Esialgu säilitasid DSL-6A/C1 rakud kultuuris kasvatamisel võime toota amülaasi, mis on iseloomulikuks eksokriinseks ensüümiks akiinirakkudele. See tootmine lakkas aga ühe kuni kahe nädala jooksul.

Aja jooksul, kui DSL-6A/C1 rakke hoiti kultuuris ja neile tehti ümberistutamiskatseid, toimus neis märkimisväärne fenotüüpiline muundumine. Rakud kaotasid akinaarsetele rakkudele iseloomulikud struktuurilised ja immunohistokeemilised markerid ning hakkasid selle asemel ekspresseerima ductusraku fenotüübile viitavaid markereid. Üks peamisi markereid, mis selle transformatsiooni käigus omandati, on tsüstilise fibroosi transmembraanregulaator (CFTR), mida tavaliselt seostatakse kõhunäärme duktaalsete rakkudega. Selline muutus markerite ekspressioonis viitab rakuliini olulisele plastilisusele, mis peegeldab rakkude identiteedi ja funktsiooni muutusi, mis võivad toimuda vastuseks in vitro keskkonnale.

Kude
Pankreas
Haigus
Kartsinoom, asaseriini indutseeritud
Metastaaside asukoht
Ductal
Sünonüümid
  • DSL-6A/C1
  • DSL6A/C1

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Atsiinirakud
Tuumorigeenne
Jah, Lewis'i rottidel tekitavad rakud tahkeid kasvajaid, mis koosnevad kanalilaadsetest struktuuridest, mida ümbritseb tihe kiudne kude

04Tunnused

Viide
DSL-6A-C1 (Cytioni katalooginumber 500166)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_4166

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Waymouth medium (Me ei paku seda toodet; palun kaaluge teisi tarnijaid. Palun andke meile teada, kui vajate täiendavat abi)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 2,0 mM L-glutamiiniga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Lewis
Doonori vanus
2 aastat