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DSL-6A-C1
Tecido
Pâncreas
Doença
Carcinoma induzido por azaserina
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
DSL-6A/C1, DSL6A/C1

Documentos

DSL-6A-C1

Cell line · Número do produto 500166

The DSL-6A/C1 cell line is a pancreatic ductal cell line originally derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma, a tumor established from ...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular DSL-6A/C1 é uma linha celular ductal pancreática originalmente derivada do carcinoma de células acinares transplantáveis DSL-6, um tumor estabelecido a partir de um carcinoma primário de células acinares do pâncreas num rato Lewis macho. Este rato foi exposto à azaserina por via intraperitoneal, o que levou ao desenvolvimento do tumor. Inicialmente, após o estabelecimento em cultura, as células DSL-6A/C1 mantiveram a capacidade de produzir amilase, uma enzima exócrina caraterística das células acinares. No entanto, esta produção cessou ao fim de uma a duas semanas de cultura.

Com o passar do tempo, à medida que as células DSL-6A/C1 eram mantidas em cultura e submetidas a experiências de reenxerto, sofreram uma notável transformação fenotípica. As células perderam marcadores estruturais e imunohistoquímicos típicos das células acinares e, em vez disso, começaram a expressar marcadores indicativos do fenótipo de células ductais. Um dos principais marcadores adquiridos durante esta transformação é o regulador transmembranar da fibrose cística (CFTR), que está normalmente associado às células ductais do pâncreas. Esta mudança na expressão dos marcadores sugere uma plasticidade significativa na linha celular, reflectindo alterações na identidade e função das células que podem ocorrer em resposta ao ambiente in vitro.

Tecido
Pâncreas
Doença
Carcinoma induzido por azaserina
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
  • DSL-6A/C1
  • DSL6A/C1

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células acinares
Tumorigénico
Sim, nos ratos Lewis as células produzem tumores sólidos compostos por estruturas semelhantes a ductos rodeadas por tecido fibroso denso

04Identificadores

Referência
DSL-6A-C1 (número de catálogo Cytion 500166)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4166

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Waymouth medium (Não fornecemos este produto; considere outros fornecedores. Por favor, informe-nos se precisar de mais assistência)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 2,0 mM de L-glutamina
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
Lewis
Idade do dador
2 anos