Pāriet uz saturu
DSL-6A-C1
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Azazerīna izraisīta karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
DSL-6A/C1, DSL6A/C1

Dokumenti

DSL-6A-C1

Cell line · Preces numurs 500166

The DSL-6A/C1 cell line is a pancreatic ductal cell line originally derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma, a tumor established from ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

DSL-6A/C1 šūnu līnija ir aizkuņģa dziedzera duktālo šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no DSL-6 transplantējamās acināro šūnu karcinomas - audzēja, kas izveidots no primārās aizkuņģa dziedzera acināro šūnu karcinomas Lewisa žurkas tēviņam. Šī žurka tika pakļauta azaserīna intraperitoneālai iedarbībai, kas izraisīja audzēja attīstību. Sākotnēji, izveidojoties kultūrā, DSL-6A/C1 šūnas saglabāja spēju ražot amilazi, kas ir akināro šūnu eksokrīnais enzīms. Tomēr viena līdz divu nedēļu ilgā kultivēšanas laikā šī ražošana tika pārtraukta.

Laika gaitā, kad DSL-6A/C1 šūnas uzturēja kultūrā un veica pārstādīšanas eksperimentus, tās piedzīvoja ievērojamu fenotipisku pārveidi. Šūnas zaudēja strukturālos un imūnhistoķīmiskos marķierus, kas raksturīgi acinārajām šūnām, un tā vietā sāka ekspresēt marķierus, kas norāda uz duktālo šūnu fenotipu. Viens no galvenajiem marķieriem, kas iegūts šīs transformācijas laikā, ir cistiskās fibrozes transmembrānu regulators (CFTR), kas parasti ir saistīts ar aizkuņģa dziedzera duktālajām šūnām. Šī marķieru ekspresijas maiņa liecina par ievērojamu šūnu līnijas plastiskumu, kas atspoguļo šūnu identitātes un funkcijas izmaiņas, kuras var notikt, reaģējot uz in vitro vidi.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Azazerīna izraisīta karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
  • DSL-6A/C1
  • DSL6A/C1

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Acīndziedzera šūnas
Tumorogēns
Jā, Lewisa žurkām šūnas rada cietus audzējus, kas sastāv no kanāliem līdzīgām struktūrām, ko ieskauj blīvi šķiedrveida audi

04Identifikatori

Atsauce
DSL-6A-C1 (Cytion kataloga numurs 500166)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_4166

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
Waymouth medium (Mēs nepiegādājam šo produktu; lūdzu, apsveriet citus piegādātājus. Lūdzu, informējiet mūs, ja jums nepieciešama papildu palīdzība)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 2,0 mM L-glutamīnu
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Lewis
Donora vecums
2 gadi