Přejít na obsah
DSL-6A-C1
Tkáň
Pankreas
Nemoc
Karcinom indukovaný azaserinem
Místo metastázy
Duktální
Synonyma
DSL-6A/C1, DSL6A/C1

Dokumenty

DSL-6A-C1

Cell line · Číslo výrobku 500166

The DSL-6A/C1 cell line is a pancreatic ductal cell line originally derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma, a tumor established from ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie DSL-6A/C1 je pankreatická duktální buněčná linie původně odvozená z transplantovatelného karcinomu z acinárních buněk DSL-6, což je nádor vzniklý z primárního karcinomu z acinárních buněk pankreatu u samce potkana Lewis. Tento potkan byl intraperitoneálně vystaven azaserinu, což vedlo ke vzniku nádoru. Zpočátku si buňky DSL-6A/C1 po založení kultury zachovaly schopnost produkovat amylázu, charakteristický exokrinní enzym acinárních buněk. Tato produkce však během jednoho až dvou týdnů kultivace ustala.

Postupem času, jak byly buňky DSL-6A/C1 udržovány v kultuře a podrobovány pokusům s přesazováním, prošly nápadnou fenotypovou transformací. Buňky ztratily strukturální a imunohistochemické markery typické pro acinární buňky a místo toho začaly exprimovat markery svědčící pro fenotyp duktálních buněk. Jedním z klíčových markerů získaných během této transformace je transmembránový regulátor cystické fibrózy (CFTR), který je běžně spojován s duktálními buňkami pankreatu. Tento posun v expresi markerů naznačuje značnou plasticitu buněčné linie, která odráží změny v identitě a funkci buněk, k nimž může docházet v reakci na prostředí in vitro.

Tkáň
Pankreas
Nemoc
Karcinom indukovaný azaserinem
Místo metastázy
Duktální
Synonyma
  • DSL-6A/C1
  • DSL6A/C1

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Acinární buňky
Tumorogenní
Ano, u Lewisových potkanů vytvářejí buňky solidní nádory složené z kanálkovitých struktur obklopených hustou vláknitou tkání

04Identifikátory

Citace
DSL-6A-C1 (katalogové číslo Cytion 500166)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4166

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
Waymouth medium (Tento produkt nedodáváme; zvažte prosím jiné dodavatele. Pokud potřebujete další pomoc, dejte nám prosím vědět)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS, 2,0 mM L-glutamin
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
Lewis
Věk dárce
2 roky