Prejsť na obsah
DSL-6A-C1
Tkanivo
Pankreas
Choroba
Karcinóm, vyvolaný azaserínom
Miesto metastáz
Duktálny
Synonymá
DSL-6A/C1, DSL6A/C1

Dokumenty

DSL-6A-C1

Cell line · Číslo výrobku 500166

The DSL-6A/C1 cell line is a pancreatic ductal cell line originally derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma, a tumor established from ...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia DSL-6A/C1 je pankreatická duktálna bunková línia pôvodne odvodená z transplantovateľného karcinómu z acinárnych buniek DSL-6, nádoru vytvoreného z primárneho karcinómu z acinárnych buniek pankreasu u samca potkana Lewisa. Tento potkan bol intraperitoneálne vystavený azaserínu, čo viedlo k vzniku nádoru. Na začiatku, po založení v kultúre, si bunky DSL-6A/C1 zachovali schopnosť produkovať amylázu, charakteristický exokrinný enzým acinárnych buniek. Táto produkcia však prestala v priebehu jedného až dvoch týždňov kultivácie.

Postupom času, keď sa bunky DSL-6A/C1 udržiavali v kultúre a podrobovali sa pokusom s opätovným štepením, prešli pozoruhodnou fenotypovou transformáciou. Bunky stratili štrukturálne a imunohistochemické markery typické pre acinárne bunky a namiesto toho začali exprimovať markery svedčiace o fenotype duktálnych buniek. Jedným z kľúčových markerov získaných počas tejto transformácie je transmembránový regulátor cystickej fibrózy (CFTR), ktorý sa bežne spája s duktálnymi bunkami pankreasu. Tento posun v expresii markerov naznačuje významnú plasticitu bunkovej línie, ktorá odráža zmeny v identite a funkcii buniek, ku ktorým môže dôjsť v reakcii na prostredie in vitro.

Tkanivo
Pankreas
Choroba
Karcinóm, vyvolaný azaserínom
Miesto metastáz
Duktálny
Synonymá
  • DSL-6A/C1
  • DSL6A/C1

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Acinárne bunky
Tumorigenický
Áno, u Lewisových potkanov bunky vytvárajú pevné nádory zložené z kanálikovitých štruktúr obklopených hustým vláknitým tkanivom

04Identifikátory

Citácia
DSL-6A-C1 (katalógové číslo Cytion 500166)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4166

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Waymouth medium (Tento výrobok nedodávame; zvážte prosím iných dodávateľov. Ak potrebujete ďalšiu pomoc, dajte nám prosím vedieť)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamín
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
Lewis
Vek darcu
2 roky