- Tessuto
- Pancreas
- Malattia
- Carcinoma indotto da azaserina
- Sito metastatico
- Duttale
- Sinonimi
- DSL-6A/C1, DSL6A/C1
Documenti
DSL-6A-C1
Cell line · Codice prodotto 500166
The DSL-6A/C1 cell line is a pancreatic ductal cell line originally derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma, a tumor established from ...
Personalizzazione / Suggerimenti
- DSL-6A-C1Cell line€430.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare DSL-6A/C1 è una linea cellulare duttale pancreatica originariamente derivata dal carcinoma a cellule acinarie trapiantabile DSL-6, un tumore creato da un carcinoma primario a cellule acinari del pancreas in un ratto Lewis maschio. Questo ratto è stato esposto all'azaserina per via intraperitoneale, portando allo sviluppo del tumore. Inizialmente, dopo l'impianto in coltura, le cellule DSL-6A/C1 hanno mantenuto la capacità di produrre amilasi, un enzima esocrino caratteristico delle cellule acinari. Tuttavia, questa produzione è cessata entro una o due settimane di coltura.
Nel corso del tempo, quando le cellule DSL-6A/C1 sono state mantenute in coltura e sottoposte a esperimenti di reinnesto, hanno subito una notevole trasformazione fenotipica. Le cellule hanno perso i marcatori strutturali e immunoistochimici tipici delle cellule acinari e hanno iniziato a esprimere marcatori indicativi del fenotipo delle cellule duttali. Uno dei marcatori chiave acquisiti durante questa trasformazione è il regolatore transmembrana della fibrosi cistica (CFTR), che è comunemente associato alle cellule duttali del pancreas. Questo cambiamento nell'espressione dei marcatori suggerisce una significativa plasticità della linea cellulare, che riflette i cambiamenti nell'identità e nella funzione delle cellule che possono verificarsi in risposta all'ambiente in vitro.
- Tessuto
- Pancreas
- Malattia
- Carcinoma indotto da azaserina
- Sito metastatico
- Duttale
- Sinonimi
- DSL-6A/C1
- DSL6A/C1
02Classificazione
- Organismo
- Ratto
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tipo di cellula
- Cellule acinari
- Tumorigenico
- Sì, nei topi di Lewis le cellule producono tumori solidi composti da strutture simili a dotti circondati da un denso tessuto fibroso
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- DSL-6A-C1 (numero di catalogo Cytion 500166)
- Codice fiscale NCBI
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_4166
05Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- Waymouth medium (Non forniamo questo prodotto; vi preghiamo di considerare altri fornitori. Fateci sapere se avete bisogno di ulteriore assistenza)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS, 2,0 mM di L-glutammina
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- 1 x 104 cellule/cm2
- Rinnovo dei fluidi
- 2 volte a settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
07Donatore
- Razza / sottospecie
- Lewis
- Età dei donatori
- 2 anni
08Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Dichiarazione di non responsabilità
- Le nostre cellule sono fornite esclusivamente per scopi di ricerca di laboratorio in vitro e non sono destinate all'uso clinico o diagnostico, né devono essere somministrate all'uomo o utilizzate per scopi veterinari. Gli utenti devono attenersi a tutte le linee guida e le normative applicabili per la manipolazione e l'uso di queste cellule in un contesto di ricerca.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì