Przejdź do treści
B16
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak myszy
Synonimy
B-16, B16 melanoma, B16 subline B78, B78

Dokumenty

B16

Cell line · Numer produktu 305154

Linia komórkowa B16 jest powszechnie stosowanym modelem mysim wyhodowanym z guzów czerniaka u myszy rasy C57BL/6. Linia ta znajduje szerokie zastosowanie w badaniach naukowych ze względu na swoją...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
Niski stan magazynowy
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa B16 jest szeroko stosowanym mysim modelem pochodzącym z guzów czerniaka u myszy C57BL/6. Linia ta jest szeroko stosowana w badaniach ze względu na jej zdolność do tworzenia guzów melanotycznych, które ściśle przypominają ludzkiego czerniaka pod względem charakterystyki wzrostu i potencjału przerzutowego. Linia komórkowa występuje w różnych podtypach, takich jak B16-F0, B16-F1 i B16-F10, przy czym każdy podtyp wykazuje różne stopnie zdolności do przerzutów; na przykład B16-F10 jest wysoce przerzutowy w porównaniu do B16-F0. Różnice te pozwalają badaczom wybrać odpowiedni model w oparciu o specyficzne wymagania ich badań dotyczących agresywności guza i przerzutów.

Komórki B16 odgrywają kluczową rolę w zrozumieniu molekularnych i komórkowych mechanizmów progresji czerniaka i testowaniu terapii przeciwnowotworowych. Ich zdolność do produkcji melaniny czyni je szczególnie przydatnymi w badaniach nad melanogenezą i jej regulacją. Ponadto linia komórkowa B16 służy jako podstawowe narzędzie do opracowywania szczepionek i eksperymentów immunoterapeutycznych, oferując wgląd w interakcje między nowotworem a układem odpornościowym oraz skuteczność środków immunomodulujących. Zdolność adaptacji tych komórek do różnych środowisk in vivo i in vitro podkreśla ich znaczenie w badaniach translacyjnych i przedklinicznych mających na celu leczenie i zapobieganie czerniakowi.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak myszy
Synonimy
  • B-16
  • B16 melanoma
  • B16 subline B78
  • B78

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Mieszanka komórek wrzecionowatych i nabłonkowych
Nowotworotwórczy
Tak

04Identyfikatory

Źródło
B16 (numer katalogowy Cytion 305154)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_F936

05Ekspresja i podatność

Produkty
Melanina

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6