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B16
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma di topo
Sinonimi
B-16, B16 melanoma, B16 subline B78, B78

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B16

Cell line · Codice prodotto 305154

La linea cellulare B16 è un modello murino ampiamente utilizzato, derivato da tumori del melanoma nei topi C57BL/6. Questa linea è ampiamente impiegata nella ricerca grazie alle sue abi...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare B16 è un modello murino ampiamente utilizzato, derivato da tumori di melanoma in topi C57BL/6. Questa linea è ampiamente utilizzata nella ricerca per la sua capacità di formare tumori melanotici che assomigliano molto al melanoma umano in termini di caratteristiche di crescita e potenziale metastatico. La linea cellulare esiste in vari sottotipi, come B16-F0, B16-F1 e B16-F10, con ciascun sottotipo che dimostra diversi gradi di capacità metastatica; ad esempio, B16-F10 è altamente metastatico rispetto a B16-F0. Queste variazioni consentono ai ricercatori di selezionare un modello appropriato in base ai requisiti specifici dei loro studi sull'aggressività del tumore e sulle metastasi.

Le cellule B16 sono fondamentali per comprendere i meccanismi molecolari e cellulari della progressione del melanoma e per testare le terapie antitumorali. La loro capacità di produrre melanina le rende particolarmente utili per gli studi sulla melanogenesi e sulla sua regolazione. Inoltre, la linea cellulare B16 funge da strumento essenziale per lo sviluppo di vaccini e per gli esperimenti di immunoterapia, offrendo approfondimenti sulle interazioni tra tumore e sistema immunitario e sull'efficacia degli agenti immunomodulatori. L'adattabilità di queste cellule a vari ambienti in vivo e in vitro sottolinea la loro importanza nella ricerca traslazionale e preclinica finalizzata al trattamento e alla prevenzione del melanoma.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma di topo
Sinonimi
  • B-16
  • B16 melanoma
  • B16 subline B78
  • B78

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Miscela di cellule a forma di fuso e cellule simili a quelle epiteliali
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
B16 (numero di catalogo Cytion 305154)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_F936

05Espressione e suscettibilità

Prodotti
Melanina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6