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B16-F10
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma di topo
Sinonimi
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Documenti

B16-F10

Cell line · Codice prodotto 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare B16-F10 è una sotto-linea della linea cellulare di melanoma murino B16, derivata da un tumore cutaneo spontaneo in un topo. Queste cellule sono caratterizzate da un potenziale metastatico aggressivo, in particolare ai polmoni, che le rende un modello prezioso per lo studio della progressione e della metastasi del melanoma. Le cellule B16-F10 presentano un elevato contenuto di melanina, che contribuisce alla loro pigmentazione e viene utilizzata come marcatore in vari test per monitorare la proliferazione cellulare e la crescita tumorale. Le cellule B16-F10 sono state ottenute con una procedura selettiva di dieci volte secondo il metodo di Fidler, che ne ha aumentato la capacità metastatica rispetto alla linea madre, B16-F0, e alla sotto-linea B16-F1, sottoposta a una procedura selettiva una tantum.

Le cellule B16-F10 sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro grazie alla loro capacità di formare tumori in topi C57BL/6 singenici, fornendo un modello coerente e riproducibile per gli studi in vivo. Queste cellule esprimono vari antigeni associati al melanoma, che sono fondamentali per studiare le risposte immunitarie e sviluppare immunoterapie. Inoltre, le cellule B16-F10 sono utilizzate per valutare l'efficacia degli agenti chemioterapici e i meccanismi molecolari alla base della resistenza ai farmaci nel melanoma. Il profilo genetico della linea cellulare e il suo comportamento in diverse condizioni sperimentali offrono approfondimenti sulle vie coinvolte nelle metastasi del melanoma, contribuendo allo sviluppo di strategie terapeutiche mirate. È da notare che il derivato di B16-F10, B16-BL6, mostra un'attività invasiva ancora maggiore, rendendo la serie B16 un sistema modello completo per lo studio di diversi aspetti della biologia e della terapia del melanoma.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma di topo
Sinonimi
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Miscela di cellule a forma di fuso e cellule simili a quelle epiteliali

04Identificatori

Riferimento bibliografico
B16-F10 (numero di catalogo Cytion 305157)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Espressione e suscettibilità

Prodotti
Melanina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6