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B16-F10
Tecido
Pele
Doença
Melanoma do ratinho
Sinónimos
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Documentos

B16-F10

Cell line · Número do produto 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A linha de células B16-F10 é uma sub-linha da linha de células de melanoma murino B16, derivada de um tumor cutâneo espontâneo num rato. Estas células são caracterizadas pelo seu potencial metastático agressivo, particularmente para os pulmões, o que as torna um modelo valioso para o estudo da progressão e metástase do melanoma. As células B16-F10 exibem um elevado teor de melanina, o que contribui para a sua pigmentação e é utilizado como marcador em vários ensaios para acompanhar a proliferação celular e o crescimento do tumor. A linhagem B16-F10 foi obtida através de um procedimento seletivo de dez vezes utilizando o método de Fidler, aumentando a sua capacidade metastática em comparação com a sua linhagem parental, B16-F0, e a sub-linhagem B16-F1, que foi submetida a um procedimento seletivo de uma só vez.

As células B16-F10 são amplamente utilizadas na investigação do cancro devido à sua capacidade de formar tumores em ratinhos C57BL/6 singénicos, proporcionando um modelo consistente e reprodutível para estudos in vivo. Estas células expressam vários antigénios associados ao melanoma, que são cruciais para investigar as respostas imunitárias e desenvolver imunoterapias. Além disso, as células B16-F10 são utilizadas para avaliar a eficácia dos agentes quimioterapêuticos e os mecanismos moleculares subjacentes à resistência aos medicamentos no melanoma. O perfil genético e o comportamento da linhagem celular em diferentes condições experimentais permitem conhecer as vias envolvidas na metástase do melanoma, auxiliando no desenvolvimento de estratégias terapêuticas específicas. É de salientar que a derivada da B16-F10, a B16-BL6, apresenta uma atividade invasiva ainda maior, tornando a série B16 um sistema modelo abrangente para o estudo de diferentes aspectos da biologia e da terapia do melanoma.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma do ratinho
Sinónimos
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Mistura de células fusiformes e epiteliais

04Identificadores

Referência
B16-F10 (número de catálogo da Cytion 305157)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Expressão e suscetibilidade

Produtos
Melanina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6