Tartalomra ugrás
B16-F10
Szövet
Bőr
Betegség
Egér melanoma
Szinonimák
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Dokumentumok

B16-F10

Cell line · Termékszám 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A B16-F10 sejtvonal az egér B16 melanoma sejtvonalának egy alvonala, amely egy egér spontán bőrdaganatából származik. Ezeket a sejteket agresszív metasztatikus potenciál jellemzi, különösen a tüdőbe, ami értékes modellé teszi őket a melanoma progressziójának és metasztázisának tanulmányozására. A B16-F10 sejtek magas melanintartalommal rendelkeznek, ami hozzájárul pigmentációjukhoz, és különböző vizsgálatokban markerként használják a sejtproliferáció és a tumor növekedésének nyomon követésére. A B16-F10-et tízszeres szelektív eljárással nyerték a Fidler-módszer alkalmazásával, ami fokozza metasztatikus képességét a B16-F0 szülővonalhoz és a B16-F1 alvonalhoz képest, amely egyszeri szelektív eljáráson esett át.

A B16-F10 sejteket széles körben használják a rákkutatásban, mivel képesek tumorokat képezni szinogén C57BL/6 egerekben, ami következetes és reprodukálható modellt biztosít az in vivo vizsgálatokhoz. Ezek a sejtek különböző melanomával kapcsolatos antigéneket expresszálnak, amelyek kulcsfontosságúak az immunválaszok vizsgálatához és az immunterápiák kifejlesztéséhez. A B16-F10 sejteket emellett a kemoterápiás szerek hatékonyságának és a melanoma gyógyszerrezisztenciájának hátterében álló molekuláris mechanizmusok értékelésére is használják. A sejtvonal genetikai profilja és a különböző kísérleti körülmények közötti viselkedése betekintést nyújt a melanoma áttétképződésében szerepet játszó útvonalakba, segítve ezzel a célzott terápiás stratégiák kifejlesztését. Figyelemre méltó, hogy a B16-F10 származéka, a B16-BL6 még nagyobb invazív aktivitást mutat, így a B16 sorozat átfogó modellrendszerré válik a melanoma biológiájának és terápiájának különböző aspektusainak tanulmányozására.

Szövet
Bőr
Betegség
Egér melanoma
Szinonimák
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Orsó alakú és hámszerű sejtek keveréke

04Azonosítók

Hivatkozás
B16-F10 (Cytion katalógusszám: 305157)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Kifejeződés és fogékonyság

Termékek
Melanin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6