Prejsť na obsah
B16-F10
Tkanivo
Koža
Choroba
Myší melanóm
Synonymá
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Dokumenty

B16-F10

Cell line · Číslo výrobku 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia B16-F10 je sublínia bunkovej línie myšieho melanómu B16 odvodená zo spontánneho kožného nádoru na myši. Tieto bunky sa vyznačujú agresívnym metastatickým potenciálom, najmä do pľúc, čo z nich robí cenný model na štúdium progresie melanómu a metastázovania. Bunky B16-F10 vykazujú vysoký obsah melanínu, ktorý prispieva k ich pigmentácii a používa sa ako marker v rôznych testoch na sledovanie proliferácie buniek a rastu nádoru. B16-F10 bola získaná desaťnásobným selektívnym postupom pomocou Fidlerovej metódy, čím sa zvýšila jej metastatická schopnosť v porovnaní s jej materskou líniou B16-F0 a sublíniou B16-F1, ktorá prešla jednorazovým selektívnym postupom.

Bunky B16-F10 sa široko používajú vo výskume rakoviny vďaka ich schopnosti vytvárať nádory v syngénnych myšiach C57BL/6, čo poskytuje konzistentný a reprodukovateľný model pre štúdie in vivo. Tieto bunky exprimujú rôzne antigény spojené s melanómom, ktoré sú kľúčové pre skúmanie imunitných reakcií a vývoj imunoterapie. Okrem toho sa bunky B16-F10 používajú na hodnotenie účinnosti chemoterapeutických látok a molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom rezistencie na lieky v melanóme. Genetický profil bunkovej línie a jej správanie za rôznych experimentálnych podmienok ponúka pohľad na cesty, ktoré sa podieľajú na metastázovaní melanómu, čo pomáha pri vývoji cielených terapeutických stratégií. Je pozoruhodné, že derivát B16-F10, B16-BL6, vykazuje ešte väčšiu invazívnu aktivitu, čím sa rad B16 stáva komplexným modelovým systémom na štúdium rôznych aspektov biológie a terapie melanómu.

Tkanivo
Koža
Choroba
Myší melanóm
Synonymá
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Zmes vretenovitých a epitelových buniek

04Identifikátory

Citácia
B16-F10 (katalógové číslo Cytion 305157)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Prejav a náchylnosť

Produkty
Melanín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6