Siirry sisältöön
B16-F10
Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma
Synonyymit
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Asiakirjat

B16-F10

Cell line · Tuotenumero 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

B16-F10-solulinja on hiiren B16-melanoomasolulinjan alalinja, joka on peräisin hiiren spontaanista ihokasvaimesta. Näille soluille on ominaista niiden aggressiivinen metastaattinen potentiaali, erityisesti keuhkoihin, mikä tekee niistä arvokkaan mallin melanooman etenemisen ja etäpesäkkeiden tutkimiseen. B16-F10-soluilla on korkea melaniinipitoisuus, joka vaikuttaa niiden pigmentaatioon ja jota käytetään merkkiaineena erilaisissa määrityksissä solujen lisääntymisen ja kasvaimen kasvun seuraamiseksi. B16-F10 saatiin kymmenkertaisella selektiivisellä menettelyllä Fidlerin menetelmää käyttäen, mikä lisäsi sen metastaattista kykyä verrattuna kantalinjaan B16-F0 ja B16-F1-alalinjaan, jolle tehtiin kertaluonteinen selektiivinen menettely.

B16-F10-soluja käytetään laajalti syöpätutkimuksessa, koska ne kykenevät muodostamaan kasvaimia syngeenisissä C57BL/6-hiirissä, mikä tarjoaa johdonmukaisen ja toistettavan mallin in vivo -tutkimuksia varten. Nämä solut ilmentävät erilaisia melanoomaan liittyviä antigeenejä, jotka ovat ratkaisevan tärkeitä immuunivasteiden tutkimisessa ja immunoterapioiden kehittämisessä. Lisäksi B16-F10-soluja käytetään kemoterapeuttisten aineiden tehokkuuden ja melanooman lääkeresistenssin taustalla olevien molekyylimekanismien arviointiin. Solulinjan geneettinen profiili ja käyttäytyminen eri koeolosuhteissa tarjoavat tietoa melanooman etäpesäkkeisiin liittyvistä reiteistä, mikä auttaa kohdennettujen hoitostrategioiden kehittämisessä. On huomionarvoista, että B16-F10:n johdannaisella, B16-BL6:lla, on vieläkin suurempi invasiivinen aktiivisuus, mikä tekee B16-sarjasta kattavan mallijärjestelmän melanooman biologian ja hoidon eri näkökohtien tutkimiseen.

Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma
Synonyymit
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Sekoitus karanmuotoisia ja epiteelin kaltaisia soluja

04Tunnisteet

Lähdeviite
B16-F10 (Cytionin tuotenumero 305157)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Ilmentyminen ja alttius

Tuotteet
Melaniini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6