Přejít na obsah
B16-F10
Tkáň
Kůže
Nemoc
Myší melanom
Synonyma
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Dokumenty

B16-F10

Cell line · Číslo výrobku 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie B16-F10 je podlinie myší melanomové buněčné linie B16, odvozená ze spontánního kožního nádoru u myši. Tyto buňky se vyznačují agresivním metastatickým potenciálem, zejména do plic, což z nich činí cenný model pro studium progrese melanomu a metastazování. Buňky B16-F10 vykazují vysoký obsah melaninu, který přispívá k jejich pigmentaci a používá se jako marker v různých testech ke sledování buněčné proliferace a růstu nádoru. B16-F10 byla získána desetinásobným selekčním postupem pomocí Fidlerovy metody, což zvýšilo její metastatickou schopnost ve srovnání s mateřskou linií B16-F0 a sublicí B16-F1, která prošla jednorázovým selekčním postupem.

Buňky B16-F10 jsou široce používány ve výzkumu rakoviny díky své schopnosti vytvářet nádory v syngenních myších C57BL/6, což poskytuje konzistentní a reprodukovatelný model pro studie in vivo. Tyto buňky exprimují různé antigeny spojené s melanomem, které jsou klíčové pro zkoumání imunitních reakcí a vývoj imunoterapie. Kromě toho se buňky B16-F10 používají k hodnocení účinnosti chemoterapeutických látek a molekulárních mechanismů, které jsou základem rezistence na léky u melanomu. Genetický profil buněčné linie a její chování za různých experimentálních podmínek nabízí pohled na dráhy zapojené do metastazování melanomu, což napomáhá vývoji cílených terapeutických strategií. Je pozoruhodné, že derivát B16-F10, B16-BL6, vykazuje ještě větší invazivní aktivitu, což z řady B16 činí komplexní modelový systém pro studium různých aspektů biologie a terapie melanomu.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Myší melanom
Synonyma
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Směs vřetenovitých a epiteliálních buněk

04Identifikátory

Citace
B16-F10 (katalogové číslo Cytion 305157)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Exprese a náchylnost

Produkty
Melanin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C57BL/6