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B16-F10
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma de ratón
Sinónimos
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Documentos

B16-F10

Cell line · Número de producto 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

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01Información general

Descripción

La línea celular B16-F10 es una sublínea de la línea celular de melanoma murino B16, derivada de un tumor cutáneo espontáneo de ratón. Estas células se caracterizan por su agresivo potencial metastásico, en particular a los pulmones, lo que las convierte en un valioso modelo para estudiar la progresión y metástasis del melanoma. Las células B16-F10 presentan un alto contenido en melanina, que contribuye a su pigmentación y se utiliza como marcador en diversos ensayos para rastrear la proliferación celular y el crecimiento tumoral. Las células B16-F10 se obtuvieron mediante un procedimiento selectivo de diez veces utilizando el método de Fidler, lo que aumentó su capacidad metastásica en comparación con su línea parental, B16-F0, y la sublínea B16-F1, que se sometió a un procedimiento selectivo de una sola vez.

Las células B16-F10 se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer debido a su capacidad para formar tumores en ratones C57BL/6 singénicos, proporcionando un modelo consistente y reproducible para estudios in vivo. Estas células expresan varios antígenos asociados al melanoma, que son cruciales para investigar las respuestas inmunitarias y desarrollar inmunoterapias. Además, las células B16-F10 se utilizan para evaluar la eficacia de los agentes quimioterapéuticos y los mecanismos moleculares subyacentes a la resistencia a los fármacos en el melanoma. El perfil genético de la línea celular y su comportamiento en diferentes condiciones experimentales permiten comprender mejor las vías implicadas en la metástasis del melanoma, lo que contribuye al desarrollo de estrategias terapéuticas específicas. Cabe destacar que el derivado de B16-F10, B16-BL6, presenta una actividad invasiva aún mayor, lo que convierte a la serie B16 en un sistema modelo completo para estudiar diferentes aspectos de la biología y la terapia del melanoma.

Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma de ratón
Sinónimos
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Mezcla de células fusiformes y epiteliales

04Identificadores

Referencia
B16-F10 (número de catálogo 305157 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Expresión y susceptibilidad

Productos
Melanina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C57BL/6