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B16-F10-Luc
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma de ratón

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B16-F10-Luc

Cell line · Número de producto 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00sin impuestos ni gastos de envío

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1

01Información general

Descripción

B16-F10-Luc es un derivado bioluminiscente de la línea celular de melanoma murino B16-F10, que se estableció originalmente a partir de un melanoma espontáneo surgido en un ratón C57BL/6. La línea parental B16-F10 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer debido a su alto potencial metastásico y a su injerto robusto y reproducible en huéspedes singénicos C57BL/6. En las células B16-F10-Luc, se ha integrado de forma estable un gen de luciferasa bajo el control de un promotor constitutivamente activo (normalmente EF-1α o CMV) mediante transducción lentiviral, lo que da lugar a una expresión de luciferasa estable y de alto nivel a lo largo de los pases.

Las células B16-F10-Luc emiten una señal bioluminiscente en presencia de un sustrato de luciferina, lo que permite la obtención de imágenes bioluminiscentes (BLI) in vivo, cuantitativas y no invasivas del crecimiento tumoral, la diseminación y la metástasis en animales vivos. La línea es adecuada tanto para modelos subcutáneos como intravenosos (metástasis experimental) en ratones C57BL/6, formándose colonias metastásicas preferentemente en los pulmones. La emisión de luminiscencia es linealmente proporcional al número de células viables, lo que permite un seguimiento longitudinal en tiempo real de la carga tumoral sin necesidad de sacrificar a los animales en cada punto temporal. La expresión de luciferasa no altera significativamente la cinética de crecimiento in vitro o in vivo de las células B16-F10.

Entre las aplicaciones clave se incluyen la evaluación de agentes antitumorales, inmunoterapias y compuestos inhibidores de la metástasis en modelos singénicos, así como la obtención de imágenes farmacodinámicas cuantitativas en estudios oncológicos preclínicos.

Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma de ratón

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Mezcla de células fusiformes y epiteliales

04Identificadores

Referencia
B16-F10-Luc (número de catálogo de Cytion 305658)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
Luc2 (luciérnaga, optimizada por codones)
Productos
Melanina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
De 1 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Control de calidad y criopreservación

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C57BL/6