B16-F10-Luc
Cell line · Prekės numeris 305658
B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- B16-F10-LucCell line€800.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
B16-F10-Luc yra bioliuminescencinis pelės melanomos ląstelių linijos B16-F10 variantas, kuris iš pradžių buvo išskirtas iš spontaniškos melanomos, atsiradusios C57BL/6 pelėje. Pirminė B16-F10 linija plačiai naudojama vėžio tyrimuose dėl savo didelio metastazavimo potencialo ir tvirto, pakartojamo įsitvirtinimo singeniniuose C57BL/6 šeimininkuose. B16-F10-Luc ląstelėse luciferazės genas buvo stabiliai integruotas, kontroliuojant nuolat aktyvų promotorių (paprastai EF-1α arba CMV) lentivirusine transdukcija, todėl pasiekiamas aukšto lygio, stabilus luciferazės ekspresijos lygis per visus pasėlių kartus.
B16-F10-Luc ląstelės skleidžia bioliuminescencinį signalą esant liuciferino substratui, o tai leidžia atlikti neinvazinį, kiekybinį in vivo bioliuminescencinį vaizdinimą (BLI) naviko augimo, išplitimo ir metastazių gyvuose gyvūnuose. Ši linija tinka tiek poodiniams, tiek intraveniniams (eksperimentinės metastazės) modeliams C57BL/6 pelėse, o metastazinės kolonijos susidaro daugiausia plaučiuose. Luminescencijos intensyvumas yra tiesiogiai proporcingas gyvybingų ląstelių skaičiui, todėl galima realiuoju laiku stebėti naviko apkrovą be gyvūnų aukojimo kiekvienu laiko momentu. Luciferazės ekspresija reikšmingai nekeičia B16-F10 ląstelių augimo kinetikos in vitro ar in vivo.
Pagrindinės taikymo sritys apima priešvėžinių vaistų, imunoterapijos ir metastazių slopinančių junginių vertinimą singeniniuose modeliuose, taip pat kiekybinį farmakodinaminį vaizdinimą ikiklinikiniuose onkologijos tyrimuose.
- Audinys
- Odos
- Liga
- Pelės melanoma
02Klasifikacija
- Organizmas
- Pele
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- GMO-S1
- Išsami informacija apie GMO statusą
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Verpstės formos ir į epitelį panašių ląstelių mišinys
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- B16-F10-Luc (Cytion katalogo numeris 305658)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_C8XU
05Išraiška ir jautrumas
- Antigeno ekspresija
- Luc2 (vabalas, kodonų optimizuotas)
- Produktai
- Melaninas
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1–3 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Veislė / porūšis
- C57BL/6
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip
.jpg)
