Μετάβαση στο περιεχόμενο
B16-F10-Luc
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Μελάνωμα ποντικού

Έγγραφα

B16-F10-Luc

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Το B16-F10-Luc είναι ένα βιοφωταυγές παράγωγο της κυτταρικής σειράς B16-F10 ποντικού μελανώματος, η οποία δημιουργήθηκε αρχικά από ένα αυθόρμητο μελάνωμα που εμφανίστηκε σε ποντίκι C57BL/6. Η μητρική σειρά B16-F10 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο λόγω του υψηλού μεταστατικού δυναμικού της και της ισχυρής, αναπαραγώγιμης εμφύτευσης σε συγγενείς ξενιστές C57BL/6. Στα κύτταρα B16-F10-Luc, ένα γονίδιο λουσιφεράσης έχει ενσωματωθεί σταθερά υπό τον έλεγχο ενός διαρκώς ενεργού προαγωγού (συνήθως EF-1α ή CMV) μέσω ιογενούς μεταγωγής, με αποτέλεσμα την υψηλού επιπέδου, σταθερή έκφραση λουσιφεράσης σε όλες τις παρτίδες.

Τα κύτταρα B16-F10-Luc εκπέμπουν βιοφωταυγές σήμα παρουσία ενός υποστρώματος λουσιφερίνης, επιτρέποντας τη μη επεμβατική, ποσοτική απεικόνιση βιοφωταύγειας (BLI) in vivo της ανάπτυξης, της διάδοσης και της μετάστασης του όγκου σε ζωντανά ζώα. Η σειρά είναι κατάλληλη τόσο για υποδόρια όσο και για ενδοφλέβια (πειραματική μετάσταση) μοντέλα σε ποντίκια C57BL/6, με μεταστατικές αποικίες που σχηματίζονται κατά προτίμηση στους πνεύμονες. Η απόδοση φωταύγειας είναι γραμμικά ανάλογη με τον αριθμό των βιώσιμων κυττάρων, επιτρέποντας την παρακολούθηση του όγκου του όγκου σε πραγματικό χρόνο και διαχρονικά χωρίς θυσία ζώων σε κάθε χρονικό σημείο. Η έκφραση της λουσιφεράσης δεν μεταβάλλει σημαντικά την κινητική ανάπτυξης των κυττάρων B16-F10 in vitro ή in vivo.

Οι βασικές εφαρμογές περιλαμβάνουν την αξιολόγηση αντικαρκινικών παραγόντων, ανοσοθεραπειών και ενώσεων που αναστέλλουν τη μετάσταση σε συγγενικά μοντέλα, καθώς και την ποσοτική φαρμακοδυναμική απεικόνιση σε προκλινικές ογκολογικές μελέτες.

Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Μελάνωμα ποντικού

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Μείγμα ατρακτοειδών και επιθηλιακών κυττάρων

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
B16-F10-Luc (αριθμός καταλόγου Cytion 305658)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_C8XU

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
Luc2 (πυγολαμπίδα, με βελτιστοποιημένα κωδόνια)
Προϊόντα
Μελανίνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C57BL/6