B16-F10-Luc
Cell line · Številka izdelka 305658
B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...
Prilagajanje / Priporočila
- B16-F10-LucCell line€800.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
B16-F10-Luc je bioluminiscenčni derivat mišje celične linije melanoma B16-F10, ki je bila prvotno vzpostavljena iz spontanega melanoma, nastalega pri miški C57BL/6. Izvorna linija B16-F10 se zaradi svojega visokega metastaznega potenciala ter trdnega in ponovljivega prijemanja v singenih gostiteljih C57BL/6 široko uporablja v raziskavah raka. V celicah B16-F10-Luc je bil gen za luciferazo stabilno integriran pod nadzorom konstitutivno aktivnega promotorja (običajno EF-1α ali CMV) z lentiviralno transdukcijo, kar ima za posledico visoko raven stabilne ekspresije luciferaze skozi vse pasaze.
Celice B16-F10-Luc oddajajo bioluminiscenčni signal v prisotnosti substrata luciferina, kar omogoča neinvazivno, kvantitativno in vivo bioluminiscenčno slikanje (BLI) rasti tumorja, širjenja in metastaziranja pri živih živalih. Linija je primerna za subkutane in intravenske (eksperimentalne metastaze) modele pri miših C57BL/6, pri čemer se metastatske kolonije prednostno tvorijo v pljučih. Luminescenčni izhod je linearno sorazmeren s številom živih celic, kar omogoča longitudinalno spremljanje tumorja v realnem času brez žrtvovanja živali v vsakem časovnem trenutku. Ekspresija luciferaze ne spreminja bistveno kinetične rasti celic B16-F10 in vitro ali in vivo.
Ključne aplikacije vključujejo ocenjevanje protitumorskih sredstev, imunoterapij in spojin, ki zavirajo metastaze, v singenih modelih, kot tudi kvantitativno farmakodinamično slikanje v predkliničnih onkoloških študijah.
- Tkivo
- Koža
- Bolezen
- Mišji melanom
02Razvrstitev
- Organizem
- Miška
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GSO
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Mešanica vretenastih in epitelijam podobnih celic
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- B16-F10-Luc (kataloška številka Cytion 305658)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_C8XU
05Izražanje in dovzetnost
- Ekspresija antigena
- Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimizirana)
- Izdelki
- Melanin
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Gostota setve
- 1 do 3 x 104 celic/cm2
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Pasma / podvrsta
- C57BL/6
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
.jpg)
