Mine otse sisu juurde
B16-F10-Luc
Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom

Dokumendid

B16-F10-Luc

Cell line · Toote number 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

B16-F10-Luc on hiire melanoomi rakuliini B16-F10 bioluminestsentsne derivaat, mis loodi algselt C57BL/6 hiirel spontaanselt tekkinud melanoomi põhjal. Ema-rakuliini B16-F10 kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes tänu selle suurele metastaaside tekkimise potentsiaalile ning tugevale ja korratavale juurdumisele süngeneetsetesse C57BL/6 peremeesorganismidesse. B16-F10-Luc rakkudes on lentiviiruse transduktsiooni abil stabiilselt integreeritud lusiferase geen konstitutiivselt aktiivse promootori (tavaliselt EF-1α või CMV) kontrolli all, mille tulemuseks on kõrgetasemeline ja stabiilne lusiferase ekspressioon kogu passaažide vältel.

B16-F10-Luc rakud kiirgavad bioluminestsentssignaali lusiferini substraadi juuresolekul, võimaldades elusloomadel teha mitteinvasiivset, kvantitatiivset in vivo bioluminestsentskuvamist (BLI) kasvaja kasvu, leviku ja metastaaside jälgimiseks. See liin sobib nii subkutaansete kui ka intravenoossete (eksperimentaalsete metastaaside) mudelite jaoks C57BL/6 hiirtel, kus metastaatilised kolooniad moodustuvad eelistatult kopsudes. Luminesentsi väljund on lineaarselt proportsionaalne eluvõimeliste rakkude arvuga, võimaldades kasvajakoormuse reaalajas pikaajalist jälgimist ilma loomade ohverdamiseta igal ajahetkel. Lusiferaasi ekspressioon ei muuda oluliselt B16-F10 rakkude in vitro või in vivo kasvukineetikat.

Peamised rakendused hõlmavad kasvajavastaste ravimite, immunoteraapiate ja metastaase pärssivate ühendite hindamist süngeensetes mudelites, samuti kvantitatiivset farmakodünaamilist kuvamist prekliinilistes onkoloogiauuringutes.

Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Spindli- ja epiteelilaadsete rakkude segu

04Tunnused

Viide
B16-F10-Luc (Cytioni katalooginumber 305658)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Tooted
Melaniin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6