Mine otse sisu juurde
B16
Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom
Sünonüümid
B-16, B16 melanoma, B16 subline B78, B78

Dokumendid

B16

Cell line · Toote number 305154

B16-rakuliin on laialdaselt kasutatav hiiremudel, mis on saadud C57BL/6 hiirte melanoomikasvajatest. Seda liini kasutatakse teadustöös laialdaselt tänu selle...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Varud on väikesed
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

B16 rakuliin on laialdaselt kasutatav hiirte mudel, mis on saadud C57BL/6 hiirte melanoomi kasvajatest. Seda rakuliini kasutatakse teadusuuringutes laialdaselt tänu selle võimele moodustada melanootilisi kasvajaid, mis sarnanevad kasvutunnuste ja metastaatilise potentsiaali poolest lähedalt inimese melanoomile. Rakuliinil on erinevaid alatüüpe, näiteks B16-F0, B16-F1 ja B16-F10, kusjuures iga alatüüp on erineva metastaatilise võimega; näiteks B16-F10 on võrreldes B16-F0-ga väga metastaatiline. Need erinevused võimaldavad teadlastel valida sobiva mudeli vastavalt oma uuringute spetsiifilistele nõuetele seoses kasvajate agressiivsuse ja metastaasiga.

B16-rakud on olulised melanoomi progresseerumise molekulaar- ja rakumehhanismide mõistmisel ja vähivastaste ravimeetodite katsetamisel. Nende melaniinitootmise võime muudab nad eriti kasulikuks melanogeneesi ja selle regulatsiooni uurimiseks. Lisaks sellele on B16 rakuliin oluline vahend vaktsiinide arendamiseks ja immunoteraapia katsete tegemiseks, andes ülevaate kasvaja ja immuunsüsteemi vastastikmõjudest ning immunomoduleerivate ainete tõhususest. Nende rakkude kohanemisvõime erinevates in vivo ja in vitro keskkondades rõhutab nende tähtsust melanoomi raviks ja ennetamiseks tehtavates translatiivsetes ja prekliinilistes uuringutes.

Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom
Sünonüümid
  • B-16
  • B16 melanoma
  • B16 subline B78
  • B78

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Spindli- ja epiteelilaadsete rakkude segu
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
B16 (Cytioni katalooginumber 305154)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_F936

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Melaniin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6