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B16
Gewebe
Haut
Krankheit
Maus-Melanom
Synonyme
B-16, B16 melanoma, B16 subline B78, B78

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B16

Cell line · Artikelnummer 305154

Die Zelllinie B16 ist ein weit verbreitetes Mausmodell, das aus Melanomtumoren von C57BL/6-Mäusen gewonnen wurde. Diese Zelllinie wird in der Forschung aufgrund ihrer Abi...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die B16-Zelllinie ist ein weit verbreitetes Mausmodell, das von Melanomtumoren in C57BL/6-Mäusen stammt. Diese Zelllinie wird in der Forschung häufig eingesetzt, da sie in der Lage ist, melanotische Tumore zu bilden, die in Bezug auf Wachstumseigenschaften und Metastasierungspotenzial dem menschlichen Melanom sehr ähnlich sind. Die Zelllinie existiert in verschiedenen Subtypen, wie B16-F0, B16-F1 und B16-F10, wobei jeder Subtyp ein unterschiedliches Maß an Metastasierungsfähigkeit aufweist; so ist B16-F10 im Vergleich zu B16-F0 hochgradig metastasierend. Diese Variationen ermöglichen es den Forschern, je nach den spezifischen Anforderungen ihrer Studien zur Tumoraggressivität und Metastasierung ein geeignetes Modell auszuwählen.

B16-Zellen sind wichtig für das Verständnis der molekularen und zellulären Mechanismen der Melanomprogression und für die Erprobung von Krebstherapien. Ihre Fähigkeit, Melanin zu produzieren, macht sie besonders nützlich für Studien zur Melanogenese und deren Regulierung. Darüber hinaus ist die B16-Zelllinie ein wichtiges Instrument für die Entwicklung von Impfstoffen und Immuntherapieexperimenten, das Einblicke in die Wechselwirkungen zwischen Tumor und Immunsystem und die Wirksamkeit immunmodulatorischer Wirkstoffe bietet. Die Anpassungsfähigkeit dieser Zellen an verschiedene In-vivo- und In-vitro-Umgebungen unterstreicht ihre Bedeutung für die translationale und präklinische Forschung zur Behandlung und Prävention des Melanoms.

Gewebe
Haut
Krankheit
Maus-Melanom
Synonyme
  • B-16
  • B16 melanoma
  • B16 subline B78
  • B78

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Gemisch aus spindelförmigen und epithelialen Zellen
Tumorauslösend
Ja

04Bezeichner

Quellenangabe
B16 (Cytion-Katalognummer 305154)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_F936

05Expression und Anfälligkeit

Produkte
Melanin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6