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B16-F0
Gewebe
Haut
Krankheit
Maus-Melanom
Synonyme
B16/F0, B16F0

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B16-F0

Cell line · Artikelnummer 300308

The B16-F0 cell line is a murine melanoma cell line derived from the B16 mouse melanoma. This cell line is widely used in cancer research due to its high ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die B16-F0-Zelllinie ist eine murine Melanomzelllinie, die vom B16-Mausmelanom abgeleitet ist. Diese Zelllinie wird aufgrund ihres hohen Metastasierungspotenzials und ihrer Fähigkeit, bei der Injektion in syngene Mäuse Tumore zu bilden, häufig in der Krebsforschung eingesetzt. B16-F0-Zellen sind besonders nützlich für die Untersuchung der molekularen Mechanismen, die dem Fortschreiten des Melanoms und der Metastasierung zugrunde liegen, sowie für die Prüfung der Wirksamkeit von Krebsmedikamenten und therapeutischen Eingriffen in präklinischen Modellen. Die B16-F0-Zelllinie ist die Stammzelllinie, von der andere Varianten wie B16-F1, B16-F10 und B16-BL6 durch selektive Verfahren zur Verbesserung spezifischer metastatischer Eigenschaften abgeleitet worden sind.

B16-F0-Zellen weisen eine typische epitheliale Morphologie auf und wachsen in der Kultur adhärent. Sie sind dafür bekannt, dass sie verschiedene Melanom-assoziierte Antigene exprimieren, was sie zu einem wertvollen Werkzeug für immunologische Studien und für die Entwicklung von Melanom-Impfstoffen macht. Darüber hinaus werden diese Zellen häufig für Studien über Genexpression, Signalwege und die Mikroumgebung des Tumors verwendet. Forscher nutzen B16-F0-Zellen, um die Wechselwirkungen zwischen Melanomzellen und dem Immunsystem zu untersuchen, wobei sie sich besonders auf die Mechanismen der Immunumgehung und -unterdrückung konzentrieren. Die Charakterisierung von B16-F0 und den davon abgeleiteten Linien bietet einen umfassenden Rahmen für das Verständnis des invasiven und metastatischen Verhaltens von Melanomen, wobei B16-F1, B16-F10 und B16-BL6 jeweils Stadien zunehmender metastatischer und invasiver Aktivität repräsentieren und somit als wichtige Modelle für die Untersuchung des Krebsfortschritts und der therapeutischen Reaktion dienen.

Gewebe
Haut
Krankheit
Maus-Melanom
Synonyme
  • B16/F0
  • B16F0

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Gemisch aus spindelförmigen und epithelialen Zellen
Zelltyp
Epithelial
Tumorauslösend
Ja, bei syngenen Mäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
B16-F0 (Cytion-Katalognummer 300308)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0604

05Expression und Anfälligkeit

Produkte
Melanin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6