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B16-F0
Tecido
Pele
Doença
Melanoma do ratinho
Sinónimos
B16/F0, B16F0

Documentos

B16-F0

Cell line · Número do produto 300308

The B16-F0 cell line is a murine melanoma cell line derived from the B16 mouse melanoma. This cell line is widely used in cancer research due to its high ...

€430.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A linha celular B16-F0 é uma linha celular de melanoma murino derivada do melanoma do ratinho B16. Esta linha celular é amplamente utilizada na investigação do cancro devido ao seu elevado potencial metastático e à sua capacidade de formar tumores quando injectada em ratinhos singénicos. As células B16-F0 são particularmente úteis para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à progressão e metástase do melanoma, bem como para testar a eficácia de medicamentos anti-cancro e intervenções terapêuticas em modelos pré-clínicos. Nomeadamente, a linha celular B16-F0 é a linha celular de origem a partir da qual outras variantes, como a B16-F1, a B16-F10 e a B16-BL6, foram derivadas através de procedimentos selectivos destinados a melhorar propriedades metastáticas específicas.

As células B16-F0 apresentam uma morfologia epitelial típica e crescem de forma aderente em cultura. Sabe-se que expressam vários antigénios associados ao melanoma, o que as torna uma ferramenta valiosa para estudos imunológicos e para o desenvolvimento de vacinas contra o melanoma. Além disso, estas células são frequentemente utilizadas em estudos que envolvem a expressão de genes, vias de sinalização e o microambiente tumoral. Os investigadores utilizam as células B16-F0 para explorar as interações entre as células do melanoma e o sistema imunitário, concentrando-se particularmente nos mecanismos de evasão e supressão imunitária. A caraterização da B16-F0 e das suas linhas derivadas fornece um quadro abrangente para a compreensão dos comportamentos invasivos e metastáticos do melanoma, com a B16-F1, a B16-F10 e a B16-BL6 a representarem, cada uma delas, fases de crescente atividade metastática e invasiva, servindo assim de modelos críticos no estudo da progressão do cancro e da resposta terapêutica.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma do ratinho
Sinónimos
  • B16/F0
  • B16F0

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Mistura de células fusiformes e epiteliais
Tipo de célula
Epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos singénicos

04Identificadores

Referência
B16-F0 (número de catálogo Cytion 300308)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0604

05Expressão e suscetibilidade

Produtos
Melanina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6