Prejsť na obsah
B16-F0
Tkanivo
Koža
Choroba
Myší melanóm
Synonymá
B16/F0, B16F0

Dokumenty

B16-F0

Cell line · Číslo výrobku 300308

The B16-F0 cell line is a murine melanoma cell line derived from the B16 mouse melanoma. This cell line is widely used in cancer research due to its high ...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia B16-F0 je línia myších melanómových buniek odvodená z myšieho melanómu B16. Táto bunková línia sa široko používa vo výskume rakoviny pre jej vysoký metastatický potenciál a schopnosť vytvárať nádory po injekčnom podaní syngenetickým myšiam. Bunky B16-F0 sú obzvlášť užitočné na štúdium molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom progresie melanómu a metastázovania, ako aj na testovanie účinnosti protirakovinových liekov a terapeutických zásahov v predklinických modeloch. Bunková línia B16-F0 je základnou bunkovou líniou, z ktorej boli selektívnymi postupmi zameranými na zlepšenie špecifických metastatických vlastností odvodené ďalšie varianty, ako napríklad B16-F1, B16-F10 a B16-BL6.

Bunky B16-F0 vykazujú typickú epitelovú morfológiu a v kultúre rastú adherentne. Je o nich známe, že exprimujú rôzne antigény spojené s melanómom, čo z nich robí cenný nástroj na imunologické štúdie a vývoj vakcín proti melanómu. Okrem toho sa tieto bunky často využívajú v štúdiách týkajúcich sa expresie génov, signálnych dráh a nádorového mikroprostredia. Výskumníci využívajú bunky B16-F0 na skúmanie interakcií medzi bunkami melanómu a imunitným systémom, najmä so zameraním na mechanizmy vyhýbania sa imunitnému systému a jeho potláčania. Charakterizácia B16-F0 a z nej odvodených línií poskytuje komplexný rámec na pochopenie invazívneho a metastatického správania melanómu, pričom B16-F1, B16-F10 a B16-BL6 predstavujú štádiá zvyšujúcej sa metastatickej a invazívnej aktivity, čím slúžia ako kritické modely pri štúdiu progresie rakoviny a terapeutickej odpovede.

Tkanivo
Koža
Choroba
Myší melanóm
Synonymá
  • B16/F0
  • B16F0

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Zmes vretenovitých a epitelových buniek
Typ bunky
Epitelové
Tumorigenický
Áno, u syngenetických myší

04Identifikátory

Citácia
B16-F0 (katalógové číslo Cytion 300308)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0604

05Prejav a náchylnosť

Produkty
Melanín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6