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B16-F0
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma di topo
Sinonimi
B16/F0, B16F0

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B16-F0

Cell line · Codice prodotto 300308

The B16-F0 cell line is a murine melanoma cell line derived from the B16 mouse melanoma. This cell line is widely used in cancer research due to its high ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare B16-F0 è una linea cellulare di melanoma murino derivata dal melanoma B16 di topo. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro grazie al suo elevato potenziale metastatico e alla capacità di formare tumori quando viene iniettata in topi singenici. Le cellule B16-F0 sono particolarmente utili per studiare i meccanismi molecolari alla base della progressione del melanoma e delle metastasi, nonché per testare l'efficacia di farmaci antitumorali e interventi terapeutici in modelli preclinici. In particolare, la linea cellulare B16-F0 è la linea cellulare madre da cui sono state derivate altre varianti, come B16-F1, B16-F10 e B16-BL6, attraverso procedure selettive volte a potenziare specifiche proprietà metastatiche.

Le cellule B16-F0 presentano una tipica morfologia epiteliale e crescono in modo aderente in coltura. Sono note per esprimere vari antigeni associati al melanoma, il che le rende uno strumento prezioso per gli studi immunologici e per lo sviluppo di vaccini contro il melanoma. Inoltre, queste cellule sono spesso impiegate in studi che riguardano l'espressione genica, le vie di segnalazione e il microambiente tumorale. I ricercatori utilizzano le cellule B16-F0 per esplorare le interazioni tra le cellule di melanoma e il sistema immunitario, concentrandosi in particolare sui meccanismi di evasione e soppressione immunitaria. La caratterizzazione di B16-F0 e delle sue linee derivate fornisce un quadro completo per la comprensione dei comportamenti invasivi e metastatici del melanoma, con B16-F1, B16-F10 e B16-BL6 che rappresentano ciascuno stadi di crescente attività metastatica e invasiva, fungendo così da modelli critici nello studio della progressione del cancro e della risposta terapeutica.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma di topo
Sinonimi
  • B16/F0
  • B16F0

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Miscela di cellule a forma di fuso e cellule simili a quelle epiteliali
Tipo di cellula
Epiteliale
Tumorigenico
Sì, in topi singenici

04Identificatori

Riferimento bibliografico
B16-F0 (numero di catalogo Cytion 300308)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0604

05Espressione e suscettibilità

Prodotti
Melanina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6