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B16-F0
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma de ratón
Sinónimos
B16/F0, B16F0

Documentos

B16-F0

Cell line · Número de producto 300308

The B16-F0 cell line is a murine melanoma cell line derived from the B16 mouse melanoma. This cell line is widely used in cancer research due to its high ...

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01Información general

Descripción

La línea celular B16-F0 es una línea celular de melanoma murino derivada del melanoma de ratón B16. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer debido a su alto potencial metastásico y a su capacidad para formar tumores cuando se inyecta en ratones singénicos. Las células B16-F0 son especialmente útiles para estudiar los mecanismos moleculares subyacentes a la progresión y metástasis del melanoma, así como para probar la eficacia de fármacos anticancerígenos e intervenciones terapéuticas en modelos preclínicos. En particular, la línea celular B16-F0 es la línea celular madre de la que se han derivado otras variantes, como B16-F1, B16-F10 y B16-BL6, mediante procedimientos selectivos destinados a potenciar propiedades metastásicas específicas.

Las células B16-F0 presentan una morfología epitelial típica y crecen de forma adherente en cultivo. Se sabe que expresan varios antígenos asociados al melanoma, lo que las convierte en una valiosa herramienta para estudios inmunológicos y para el desarrollo de vacunas contra el melanoma. Además, estas células se emplean a menudo en estudios relacionados con la expresión génica, las vías de señalización y el microentorno tumoral. Los investigadores utilizan células B16-F0 para explorar las interacciones entre las células de melanoma y el sistema inmunitario, centrándose especialmente en los mecanismos de evasión y supresión inmunitaria. La caracterización de B16-F0 y sus líneas derivadas proporciona un marco completo para comprender los comportamientos invasivos y metastásicos del melanoma, con B16-F1, B16-F10 y B16-BL6, cada una de las cuales representa etapas de creciente actividad metastásica e invasiva, sirviendo así como modelos críticos en el estudio de la progresión del cáncer y la respuesta terapéutica.

Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma de ratón
Sinónimos
  • B16/F0
  • B16F0

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Mezcla de células fusiformes y epiteliales
Tipo de célula
Epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones singénicos

04Identificadores

Referencia
B16-F0 (número de catálogo de Cytion 300308)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0604

05Expresión y susceptibilidad

Productos
Melanina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C57BL/6