Siirry sisältöön
B16-F0
Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma
Synonyymit
B16/F0, B16F0

Asiakirjat

B16-F0

Cell line · Tuotenumero 300308

The B16-F0 cell line is a murine melanoma cell line derived from the B16 mouse melanoma. This cell line is widely used in cancer research due to its high ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

B16-F0-solulinja on hiiren melanoomasolulinja, joka on peräisin hiiren B16-melanoomasta. Tätä solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuksessa sen suuren metastaattisen potentiaalin ja kyvyn muodostaa kasvaimia, kun se ruiskutetaan syngeenisiin hiiriin. B16-F0-solut ovat erityisen käyttökelpoisia melanooman etenemisen ja etäpesäkkeiden muodostumisen taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen sekä syöpälääkkeiden ja terapeuttisten toimenpiteiden tehokkuuden testaamiseen prekliinisissä malleissa. Erityisesti B16-F0-solulinja on kantasolulinja, josta on johdettu muita variantteja, kuten B16-F1, B16-F10 ja B16-BL6, valikoivilla menetelmillä, joilla on pyritty parantamaan erityisiä metastaattisia ominaisuuksia.

B16-F0-soluilla on tyypillinen epiteelimorfologia, ja ne kasvavat tarttuvasti viljelyssä. Niiden tiedetään ilmentävän erilaisia melanoomaan liittyviä antigeenejä, mikä tekee niistä arvokkaan välineen immunologisiin tutkimuksiin ja melanooma-rokotteiden kehittämiseen. Lisäksi näitä soluja käytetään usein tutkimuksissa, jotka koskevat geeniekspressiota, signaalireittejä ja kasvaimen mikroympäristöä. Tutkijat käyttävät B16-F0-soluja tutkiessaan melanoomasolujen ja immuunijärjestelmän vuorovaikutusta ja keskittyvät erityisesti immuunijärjestelmän väistämis- ja tukahduttamismekanismeihin. B16-F0:n ja siitä johdettujen linjojen karakterisointi tarjoaa kattavat puitteet melanooman invasiivisen ja metastaattisen käyttäytymisen ymmärtämiselle, sillä B16-F1, B16-F10 ja B16-BL6 edustavat kukin lisääntyvän metastaattisen ja invasiivisen aktiivisuuden vaiheita ja toimivat siten kriittisinä malleina syövän etenemisen ja terapeuttisen vasteen tutkimisessa.

Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma
Synonyymit
  • B16/F0
  • B16F0

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Sekoitus karanmuotoisia ja epiteelin kaltaisia soluja
Solutyyppi
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, syngeenisissä hiirissä

04Tunnisteet

Lähdeviite
B16-F0 (Cytionin luettelonumero 300308)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0604

05Ilmentyminen ja alttius

Tuotteet
Melaniini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6