Siirry sisältöön
B16-F10-Luc
Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma

Asiakirjat

B16-F10-Luc

Cell line · Tuotenumero 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

B16-F10-Luc on bioluminesoiva johdannainen B16-F10-hiirimelanoomasolulinjasta, joka on alun perin peräisin C57BL/6-hiiressä spontaanisti kehittyneestä melanoomasta. Alkuperäistä B16-F10-solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuksessa sen suuren metastaattisen potentiaalin sekä vankan ja toistettavan elinsiirron ansiosta syngeneisissä C57BL/6-isäntäeläimissä. B16-F10-Luc-soluissa lusiferaasigeeni on integroitu stabiilisti konstitutiivisesti aktiivisen promoottorin (yleensä EF-1α tai CMV) ohjaukseen lentiviruksen välityksellä, mikä johtaa korkeatasoiseen ja stabiiliin lusiferaasin ilmentymiseen soluviljelmien välillä.

B16-F10-Luc-solut lähettävät bioluminesenssisignaalia lusiferin-substraatin läsnä ollessa, mikä mahdollistaa elävien eläinten kasvaimen kasvun, leviämisen ja etäpesäkkeiden ei-invasiivisen, kvantitatiivisen in vivo -bioluminesenssikuvantamisen (BLI). Kanta sopii sekä subkutaanisiin että laskimonsisäisiin (kokeelliset metastaasit) malleihin C57BL/6-hiirillä, ja metastaattiset pesäkkeet muodostuvat ensisijaisesti keuhkoihin. Luminesenssituotto on lineaarisesti verrannollinen elävien solujen lukumäärään, mikä mahdollistaa kasvaimen kuormituksen reaaliaikaisen, pitkittäisen seurannan ilman eläinten uhraamista kussakin ajankohdassa. Lusiferaasin ilmentyminen ei muuta merkittävästi B16-F10-solujen in vitro- tai in vivo -kasvukineettistä.

Tärkeimpiä sovelluksia ovat syövänhoitovalmisteiden, immunoterapioiden ja metastaaseja estävien yhdisteiden arviointi syngeneisissä malleissa sekä kvantitatiivinen farmakodynaaminen kuvantaminen prekliinisissä onkologiatutkimuksissa.

Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Sekoitus karanmuotoisia ja epiteelin kaltaisia soluja

04Tunnisteet

Lähdeviite
B16-F10-Luc (Cytion-tuotenumero 305658)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)
Tuotteet
Melaniini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6