Tartalomra ugrás
B16-F10-Luc
Szövet
Bőr
Betegség
Egér melanoma

Dokumentumok

B16-F10-Luc

Cell line · Termékszám 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A B16-F10-Luc a B16-F10 egér melanóma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet eredetileg egy C57BL/6 egérben kialakult spontán melanómából állítottak elő. Az eredeti B16-F10 vonalat széles körben használják a rákkutatásban, mivel nagy a metasztatikus potenciálja, és szingén C57BL/6 gazdaszervezetekben erőteljes, reprodukálható beültetődést mutat. A B16-F10-Luc sejtekben egy luciferáz gént integráltak stabilan egy konstitutív módon aktív promóter (általában EF-1α vagy CMV) irányítása alatt lentivirális transzdukcióval, ami magas szintű, stabil luciferáz expressziót eredményez a passzázsok során.

A B16-F10-Luc sejtek luciferin szubsztrát jelenlétében biolumineszcens jelet bocsátanak ki, lehetővé téve a tumor növekedésének, terjedésének és metasztázisának nem invazív, kvantitatív in vivo biolumineszcens képalkotását (BLI) élő állatokban. A vonal alkalmas mind szubkután, mind intravénás (kísérleti metasztázis) modellekhez C57BL/6 egerekben, ahol a metasztatikus kolóniák elsősorban a tüdőben alakulnak ki. A lumineszcencia kimenet lineárisan arányos az életképes sejtek számával, ami lehetővé teszi a tumorterhelés valós idejű, longitudinális monitorozását anélkül, hogy az egyes időpontokban állatokat kellene leölni. A luciferáz expresszió nem változtatja meg jelentősen a B16-F10 sejtek in vitro vagy in vivo növekedési kinetikáját.

A legfontosabb alkalmazások közé tartozik a daganatellenes szerek, immunterápiák és metasztázisgátló vegyületek értékelése szingén modellekben, valamint a kvantitatív farmakodinamikai képalkotás preklinikai onkológiai vizsgálatokban.

Szövet
Bőr
Betegség
Egér melanoma

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Orsó alakú és hámszerű sejtek keveréke

04Azonosítók

Hivatkozás
B16-F10-Luc (Cytion katalógusszám: 305658)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)
Termékek
Melanin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6