Přejít na obsah
B16-F10-Luc
Tkáň
Kůže
Nemoc
Myší melanom

Dokumenty

B16-F10-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

B16-F10-Luc je bioluminiscenční derivát myší melanomové buněčné linie B16-F10, která byla původně izolována ze spontánního melanomu vzniklého u myši C57BL/6. Původní linie B16-F10 je v onkologickém výzkumu široce využívána díky svému vysokému metastatickému potenciálu a silné, reprodukovatelné implantaci u syngenních hostitelů C57BL/6. V buňkách B16-F10-Luc byl gen luciferázy stabilně integrován pod kontrolou konstitutivně aktivního promotoru (obvykle EF-1α nebo CMV) pomocí lentivirové transdukce, což vede k vysoké a stabilní expresi luciferázy napříč pasážemi.

Buňky B16-F10-Luc vyzařují bioluminiscenční signál v přítomnosti substrátu luciferinu, což umožňuje neinvazivní, kvantitativní in vivo bioluminiscenční zobrazování (BLI) růstu nádoru, šíření a metastázování u živých zvířat. Tato linie je vhodná jak pro subkutánní, tak pro intravenózní (experimentální metastázy) modely u myší C57BL/6, přičemž metastatické kolonie se tvoří preferenčně v plicích. Luminescenční výstup je lineárně úměrný počtu životaschopných buněk, což umožňuje longitudinální monitorování nádorové zátěže v reálném čase bez nutnosti usmrcování zvířat v jednotlivých časových bodech. Exprese luciferázy významně nemění kinetiku růstu buněk B16-F10 in vitro ani in vivo.

Mezi klíčové aplikace patří hodnocení protinádorových látek, imunoterapií a sloučenin inhibujících metastázy v syngenních modelech, stejně jako kvantitativní farmakodynamické zobrazování v preklinických onkologických studiích.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Myší melanom

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Směs vřetenovitých a epiteliálních buněk

04Identifikátory

Citace
B16-F10-Luc (katalogové číslo Cytion 305658)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)
Produkty
Melanin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C57BL/6