İçeriğe atla
B16-F10-Luc
Doku
Cilt
Hastalık
Fare melanomu

B16-F10-Luc

Cell line · Ürün numarası 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

B16-F10-Luc, aslen bir C57BL/6 faresinde ortaya çıkan spontan bir melanomdan elde edilen B16-F10 fare melanom hücre hattının biyolüminesan bir türevidir. Ana B16-F10 hattı, yüksek metastaz potansiyeli ve singenik C57BL/6 konakçılarda sağlam, tekrarlanabilir greftleme özelliği nedeniyle kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. B16-F10-Luc hücrelerinde, bir lusiferaz geni, lentiviral transdüksiyon yoluyla konstitütif olarak aktif bir promotörün (genellikle EF-1α veya CMV) kontrolü altında stabil bir şekilde entegre edilmiştir; bu da pasajlar boyunca yüksek seviyede, stabil lusiferaz ekspresyonu ile sonuçlanmaktadır.

B16-F10-Luc hücreleri, bir lusiferin substratının varlığında biyolüminesan sinyal yayar ve bu da canlı hayvanlarda tümör büyümesi, yayılımı ve metastazının non-invaziv, kantitatif in vivo biyolüminesans görüntülemesini (BLI) mümkün kılar. Bu hücre hattı, C57BL/6 farelerde hem subkutan hem de intravenöz (deneysel metastaz) modeller için uygundur ve metastatik koloniler tercihen akciğerlerde oluşur. Lüminesans çıkışı, canlı hücre sayısıyla doğrusal olarak orantılıdır; bu da, her zaman noktasında hayvanları feda etmeden tümör yükünün gerçek zamanlı, uzunlamasına izlenmesine olanak tanır. Lusiferaz ekspresyonu, B16-F10 hücrelerinin in vitro veya in vivo büyüme kinetiklerini önemli ölçüde değiştirmez.

Başlıca uygulamalar arasında, singenik modellerde antitümör ajanların, immünoterapilerin ve metastazı inhibe eden bileşiklerin değerlendirilmesinin yanı sıra, preklinik onkoloji çalışmalarında kantitatif farmakodinamik görüntüleme yer almaktadır.

Doku
Cilt
Hastalık
Fare melanomu

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
İğ şeklindeki ve epitel benzeri hücrelerin karışımı

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
B16-F10-Luc (Cytion katalog numarası 305658)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)
Ürünler
Melanin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
C57BL/6