Aller directement au contenu
B16-F10-Luc
Tissu
Peau
Maladie
Mélanome de souris

Documents

B16-F10-Luc

Cell line · Référence du produit 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée B16-F10-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire murine de mélanome B16-F10, initialement établie à partir d’un mélanome spontané survenu chez une souris C57BL/6. La lignée parentale B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer en raison de son fort potentiel métastatique et de sa greffe robuste et reproductible chez des hôtes syngéniques C57BL/6. Dans les cellules B16-F10-Luc, un gène de luciférase a été intégré de manière stable sous le contrôle d'un promoteur constitutivement actif (généralement EF-1α ou CMV) par transduction lentivirale, ce qui se traduit par une expression stable et à haut niveau de la luciférase au fil des passages.

Les cellules B16-F10-Luc émettent un signal bioluminescent en présence d'un substrat de luciférine, permettant une imagerie par bioluminescence (BLI) in vivo quantitative et non invasive de la croissance, de la dissémination et des métastases tumorales chez les animaux vivants. Cette lignée convient à la fois aux modèles sous-cutanés et intraveineux (métastases expérimentales) chez la souris C57BL/6, les colonies métastatiques se formant de préférence dans les poumons. Le rendement luminescent est linéairement proportionnel au nombre de cellules viables, ce qui permet une surveillance longitudinale en temps réel de la charge tumorale sans sacrifice des animaux à chaque point de temps. L'expression de la luciférase ne modifie pas de manière significative la cinétique de croissance in vitro ou in vivo des cellules B16-F10.

Les principales applications comprennent l'évaluation d'agents antitumoraux, d'immunothérapies et de composés inhibiteurs de métastases dans des modèles syngéniques, ainsi que l'imagerie pharmacodynamique quantitative dans les études oncologiques précliniques.

Tissu
Peau
Maladie
Mélanome de souris

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Mélange de cellules fusiformes et épithéliales

04Identifiants

Référence
B16-F10-Luc (référence Cytion 305658)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)
Produits
Mélanine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 à 3 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
C57BL/6