Gå til innholdet
B16-F10-Luc
Vev
Hud
Sykdom
Melanom hos mus

Dokumenter

B16-F10-Luc

Cell line · Produktnummer 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

B16-F10-Luc er et bioluminescerende derivat av den murine melanomcellelinjen B16-F10, som opprinnelig ble etablert fra et spontant melanom som oppstod hos en C57BL/6-mus. Den opprinnelige B16-F10-linjen er mye brukt i kreftforskning på grunn av sitt høye metastasepotensial og sin robuste, reproduserbare innpodning i syngene C57BL/6-verter. I B16-F10-Luc-celler er et luciferasegen stabilt integrert under kontroll av en konstant aktiv promotor (vanligvis EF-1α eller CMV) ved hjelp av lentiviral transduksjon, noe som resulterer i høyt nivå og stabil luciferaseekspresjon gjennom flere passasjer.

B16-F10-Luc-celler avgir et bioluminescerende signal i nærvær av et luciferinsubstrat, noe som muliggjør ikke-invasiv, kvantitativ in vivo bioluminescensavbildning (BLI) av tumorvekst, spredning og metastase hos levende dyr. Linjen er egnet for både subkutane og intravenøse (eksperimentell metastasering) modeller i C57BL/6-mus, med metastatiske kolonier som dannes fortrinnsvis i lungene. Luminescensutgangen er lineært proporsjonal med antall levedyktige celler, noe som muliggjør sanntids, longitudinell overvåking av tumorbyrden uten å avlive dyrene ved hvert tidspunkt. Luciferaseekspresjon endrer ikke vekstkinetikken til B16-F10-celler in vitro eller in vivo i nevneverdig grad.

Viktige anvendelser inkluderer evaluering av antitumormidler, immunterapier og metastashemmende forbindelser i syngene modeller, samt kvantitativ farmakodynamisk avbildning i prekliniske onkologistudier.

Vev
Hud
Sykdom
Melanom hos mus

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Blanding av spindelformede og epitellignende celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B16-F10-Luc (Cytion-katalognummer 305658)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
Luc2 (ildflue, kodonoptimalisert)
Produkter
Melanin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C57BL/6