الانتقال إلى المحتوى
B16-F10-Luc
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني لدى الفئران

المستندات

B16-F10-Luc

Cell line · رقم المنتج 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

B16-F10-Luc هو مشتق متألق بيولوجيًا من سلالة خلايا سرطان الجلد الفئراني B16-F10، التي تم إنشاؤها في الأصل من ورم سرطاني جلدي عفوي ظهر في فأر من سلالة C57BL/6. وتُستخدم سلالة B16-F10 الأصلية على نطاق واسع في أبحاث السرطان نظرًا لقدرتها العالية على الانتشار، وقدرتها القوية والقابلة للتكرار على الانغراس في مضيفات متجانسة من سلالة C57BL/6. في خلايا B16-F10-Luc، تم دمج جين اللوسيفيراز بشكل مستقر تحت سيطرة مروج نشط بشكل دائم (عادةً EF-1α أو CMV) عن طريق التحويل الفيروسي البطيء، مما أدى إلى تعبير مستقر وعالي المستوى للوسيفيراز عبر المراحل.

تصدر خلايا B16-F10-Luc إشارة بيولوجية مضيئة في وجود ركيزة اللوسيفيرين، مما يتيح التصوير البيولوجي المضيء (BLI) الكمي غير الجراحي في الجسم الحي لنمو الورم وانتشاره وانتقاله في الحيوانات الحية. هذه السلالة مناسبة لكل من النماذج تحت الجلد والوريدية (الانتشار التجريبي) في فئران C57BL/6، مع تكوين مستعمرات منتشرة بشكل تفضيلي في الرئتين. إن ناتج اللمعان يتناسب خطيًا مع عدد الخلايا الحية، مما يسمح بالمراقبة الطولية في الوقت الحقيقي لحمل الورم دون التضحية بالحيوانات في كل نقطة زمنية. لا يغير التعبير عن اللوسيفيراز بشكل كبير حركيات نمو خلايا B16-F10 في المختبر أو في الجسم الحي.

تشمل التطبيقات الرئيسية تقييم العوامل المضادة للأورام، والعلاجات المناعية، والمركبات المثبطة للانبثاث في النماذج المتجانسة، بالإضافة إلى التصوير الدوائي الكمي في الدراسات الأورامية قبل السريرية.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني لدى الفئران

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
مزيج من الخلايا المغزلية الشكل والخلايا الشبيهة بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
B16-F10-Luc (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305658)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_C8XU

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
Luc2 (اليراعة، مُحسَّن الكودونات)
المنتجات
الميلانين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 3 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل + 10% DMSO للحصول على صلاحية كافية بعد ذوبان الجليد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
C57BL/6