الانتقال إلى المحتوى
B16
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني لدى الفئران
المرادفات
B-16, B16 melanoma, B16 subline B78, B78

المستندات

B16

Cell line · رقم المنتج 305154

يُعد خط الخلايا B16 نموذجًا فئرانيًّا شائع الاستخدام مشتقًّا من أورام الميلانوما في الفئران من سلالة C57BL/6. ويُستخدم هذا الخط على نطاق واسع في الأبحاث نظرًا لـ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
مخزون منخفض
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

يعتبر خط الخلايا B16 نموذجاً مستخدماً على نطاق واسع من الفئران المشتقة من أورام الورم الميلانيني في الفئران C57BL/6. يُستخدم هذا الخط على نطاق واسع في الأبحاث نظراً لقدرته على تكوين أورام ميلانينية تشبه إلى حد كبير الورم الميلانيني البشري من حيث خصائص النمو والقدرة على الانتقال. يوجد هذا الخط الخلوي في أنواع فرعية مختلفة، مثل B16-F0 وB16-F1 وB16-F10، حيث يُظهر كل نوع فرعي درجات متفاوتة من القدرة على الانتقال؛ على سبيل المثال، B16-F10 شديد الانتشار مقارنةً ب B16-F0. وتسمح هذه الاختلافات للباحثين باختيار نموذج مناسب بناءً على المتطلبات المحددة لدراساتهم المتعلقة بعدوانية الورم وانتشاره.

تعتبر خلايا B16 مفيدة في فهم الآليات الجزيئية والخلوية لتطور الورم الميلانيني واختبار العلاجات المضادة للسرطان. كما أن قدرتها على إنتاج الميلانين تجعلها مفيدة بشكل خاص في الدراسات المتعلقة بتكوين الميلانين وتنظيمه. وعلاوة على ذلك، يُستخدم خط الخلايا B16 كأداة أساسية لتطوير اللقاحات وتجارب العلاج المناعي، مما يوفر نظرة ثاقبة لتفاعلات الجهاز المناعي للورم وفعالية العوامل المعدلة للمناعة. وتؤكد قدرة هذه الخلايا على التكيف مع بيئات مختلفة في الجسم الحي وفي المختبر على أهميتها في الأبحاث الانتقالية وما قبل السريرية التي تهدف إلى علاج الورم الميلانيني والوقاية منه.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني لدى الفئران
المرادفات
  • B-16
  • B16 melanoma
  • B16 subline B78
  • B78

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
مزيج من الخلايا المغزلية الشكل والخلايا الشبيهة بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم

04المعرّفات

المرجع
B16 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305154)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_F936

05التعبير والقابلية للإصابة

المنتجات
الميلانين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
C57BL/6