Siirry sisältöön
B16
Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma
Synonyymit
B-16, B16 melanoma, B16 subline B78, B78

Asiakirjat

B16

Cell line · Tuotenumero 305154

B16-solulinja on laajalti käytetty hiirimalli, joka on peräisin C57BL/6-hiirten melanoomakasvaimista. Tätä solulinjaa hyödynnetään laajasti tutkimuksessa sen...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa vähän
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

B16-solulinja on laajalti käytetty hiirimalli, joka on peräisin C57BL/6-hiirten melanoomakasvaimista. Tätä linjaa käytetään laajalti tutkimuksessa, koska se kykenee muodostamaan melanoottisia kasvaimia, jotka muistuttavat läheisesti ihmisen melanoomaa kasvuominaisuuksiltaan ja etäpesäkkeiden muodostamispotentiaaliltaan. Solulinjasta on olemassa erilaisia alatyyppejä, kuten B16-F0, B16-F1 ja B16-F10, ja kullakin alatyypillä on eriasteinen metastaattinen kyky; esimerkiksi B16-F10 on erittäin metastaattinen verrattuna B16-F0:aan. Näiden erojen ansiosta tutkijat voivat valita sopivan mallin kasvaimen aggressiivisuutta ja etäpesäkkeitä koskevien tutkimustensa erityisvaatimusten perusteella.

B16-solut ovat tärkeitä melanooman etenemisen molekyyli- ja solumekanismien ymmärtämisessä ja syöpähoitojen testaamisessa. Niiden melaniinia tuottava kyky tekee niistä erityisen hyödyllisiä melanogeneesiä ja sen säätelyä koskevissa tutkimuksissa. Lisäksi B16-solulinja on tärkeä väline rokotteiden kehittämisessä ja immunoterapian kokeissa, sillä se tarjoaa tietoa kasvaimen ja immuunijärjestelmän vuorovaikutuksesta ja immunomoduloivien aineiden tehokkuudesta. Näiden solujen sopeutumiskyky erilaisiin in vivo ja in vitro -ympäristöihin korostaa niiden merkitystä melanooman hoitoon ja ehkäisyyn tähtäävässä translaatiotutkimuksessa ja prekliinisessä tutkimuksessa.

Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren melanooma
Synonyymit
  • B-16
  • B16 melanoma
  • B16 subline B78
  • B78

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Sekoitus karanmuotoisia ja epiteelin kaltaisia soluja
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä

04Tunnisteet

Lähdeviite
B16 (Cytion-tuotenumero 305154)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_F936

05Ilmentyminen ja alttius

Tuotteet
Melaniini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6