Pāriet uz saturu
B16
Audums
Āda
Slimība
Peles melanoma
Sinonīmi
B-16, B16 melanoma, B16 subline B78, B78

Dokumenti

B16

Cell line · Preces numurs 305154

B16 šūnu līnija ir plaši izmantots peles modelis, kas iegūts no C57BL/6 pelēm raksturīgiem melanomas audzējiem. Šo līniju plaši izmanto pētniecībā, jo tā ir...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

B16 šūnu līnija ir plaši izmantots peļu modelis, kas iegūts no C57BL/6 peļu melanomas audzējiem. Šī līnija tiek plaši izmantota pētniecībā, jo tā spēj veidot melanotiskus audzējus, kas pēc augšanas īpašībām un metastātiskā potenciāla ļoti līdzinās cilvēka melanomai. Šai šūnu līnijai ir dažādi apakštipi, piemēram, B16-F0, B16-F1 un B16-F10, un katram apakštipam ir atšķirīga metastātisku spēju pakāpe; piemēram, B16-F10 ir ļoti metastātiska salīdzinājumā ar B16-F0. Šīs variācijas ļauj pētniekiem izvēlēties piemērotu modeli, pamatojoties uz specifiskām prasībām, kas saistītas ar audzēju agresivitāti un metastāzēm.

B16 šūnas ir noderīgas, lai izprastu melanomas progresēšanas molekulāros un šūnu mehānismus un pārbaudītu pretvēža terapiju. To spēja ražot melanīnu padara tās īpaši noderīgas melanogēzes un tās regulācijas pētījumiem. Turklāt B16 šūnu līnija kalpo kā būtisks rīks vakcīnu izstrādē un imūnterapijas eksperimentos, sniedzot ieskatu audzēja un imūnsistēmas mijiedarbībā un imunomodulējošo līdzekļu efektivitātē. Šo šūnu spēja pielāgoties dažādām in vivo un in vitro vidēm uzsver to nozīmīgumu praktiskajos un pirmsklīniskajos pētījumos, kuru mērķis ir melanomas ārstēšana un profilakse.

Audums
Āda
Slimība
Peles melanoma
Sinonīmi
  • B-16
  • B16 melanoma
  • B16 subline B78
  • B78

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Vārpveida un epitēlijveidīgu šūnu maisījums
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
B16 (Cytion kataloga numurs 305154)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_F936

05Pazīmes un uzņēmība

Produkti
Melanīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6