Pāriet uz saturu
B16-F10
Audums
Āda
Slimība
Peles melanoma
Sinonīmi
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Dokumenti

B16-F10

Cell line · Preces numurs 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

B16-F10 šūnu līnija ir peļu B16 melanomas šūnu līnijas apakšlīnija, kas iegūta no spontāna peļu ādas audzēja. Šīm šūnām ir raksturīgs agresīvs metastāžu potenciāls, jo īpaši plaušās, tāpēc tās ir vērtīgs modelis melanomas progresēšanas un metastāžu izpētei. B16-F10 šūnām ir augsts melanīna saturs, kas veicina to pigmentāciju un tiek izmantots kā marķieris dažādos testos, lai izsekotu šūnu proliferāciju un audzēja augšanu. B16-F10 tika iegūta, izmantojot Fidlera metodi, desmit reizes veicot selekcijas procedūru, kas palielina tās metastātiskās spējas salīdzinājumā ar tās vecāko līniju B16-F0 un apakšlīniju B16-F1, kurai veica vienreizēju selekcijas procedūru.

B16-F10 šūnas plaši izmanto vēža pētījumos, jo tās spēj veidot audzējus singēniskām C57BL/6 pelēm, nodrošinot konsekventu un reproducējamu modeli pētījumiem in vivo. Šīs šūnas ekspresē dažādus ar melanomu saistītus antigēnus, kas ir ļoti svarīgi, lai pētītu imūnās atbildes reakcijas un izstrādātu imūnterapiju. Turklāt B16-F10 šūnas izmanto, lai novērtētu ķīmijterapeitisko līdzekļu efektivitāti un molekulāros mehānismus, kas nosaka melanomas rezistenci pret zālēm. Šūnu līnijas ģenētiskais profils un uzvedība dažādos eksperimentālos apstākļos sniedz ieskatu par melanomas metastāzēšanā iesaistītajiem ceļiem, palīdzot izstrādāt mērķtiecīgas terapeitiskās stratēģijas. Jāatzīmē, ka B16-F10 atvasinājums B16-BL6 uzrāda vēl lielāku invazīvo aktivitāti, padarot B16 līniju par visaptverošu modeļa sistēmu dažādu melanomas bioloģijas un terapijas aspektu izpētei.

Audums
Āda
Slimība
Peles melanoma
Sinonīmi
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Vārpveida un epitēlijveidīgu šūnu maisījums

04Identifikatori

Atsauce
B16-F10 (Cytion kataloga numurs 305157)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Pazīmes un uzņēmība

Produkti
Melanīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6