Mine otse sisu juurde
B16-F10
Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom
Sünonüümid
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Dokumendid

B16-F10

Cell line · Toote number 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

B16-F10 rakuliin on hiire B16 melanoomi rakuliini alamliin, mis on saadud hiire spontaansest nahakasvajast. Neid rakke iseloomustab nende agressiivne metastaatiline potentsiaal, eriti kopsudesse, mis teeb neist väärtusliku mudeli melanoomi progresseerumise ja metastaaside tekke uurimiseks. B16-F10 rakkudel on suur melaniinisisaldus, mis aitab kaasa nende pigmentatsioonile ja mida kasutatakse markerina erinevates analüüsides rakkude proliferatsiooni ja kasvaja kasvu jälgimiseks. B16-F10 saadi kümnekordse selektiivse protseduuri abil, kasutades Fidleri meetodit, mis suurendab selle metastaatilist võimekust võrreldes selle vanemliini B16-F0 ja alamliiniga B16-F1, mille puhul kasutati ühekordset selektiivset protseduuri.

B16-F10 rakke kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes tänu nende võimele moodustada kasvajaid süngeensetes C57BL/6 hiirtel, mis on järjepidev ja korratav mudel in vivo uuringuteks. Need rakud ekspresseerivad erinevaid melanoomiga seotud antigeene, mis on olulised immuunvastuste uurimiseks ja immuunravimite väljatöötamiseks. Lisaks kasutatakse B16-F10 rakke kemoterapeutiliste ainete tõhususe ja melanoomi ravimresistentsuse aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide hindamiseks. Rakuliini geneetiline profiil ja käitumine erinevates katsetustingimustes annab ülevaate melanoomi metastaasis osalevatest radadest, mis aitab kaasa sihipäraste ravistrateegiate väljatöötamisele. On märkimisväärne, et B16-F10 derivaat B16-BL6 on veelgi suurema invasiivse aktiivsusega, mistõttu on B16-seeria põhjalik mudelisüsteem melanoomi bioloogia ja ravi erinevate aspektide uurimiseks.

Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom
Sünonüümid
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Spindli- ja epiteelilaadsete rakkude segu

04Tunnused

Viide
B16-F10 (Cytioni katalooginumber 305157)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Melaniin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6