Mine otse sisu juurde
B16-F0
Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom
Sünonüümid
B16/F0, B16F0

Dokumendid

B16-F0

Cell line · Toote number 300308

The B16-F0 cell line is a murine melanoma cell line derived from the B16 mouse melanoma. This cell line is widely used in cancer research due to its high ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

B16-F0 rakuliin on hiire melanoomi B16 rakuliin, mis on saadud hiire melanoomist. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes selle suure metastaatilise potentsiaali ja võime tõttu moodustada kasvajaid, kui seda süstitakse süngeensetele hiirtele. B16-F0 rakud on eriti kasulikud melanoomi progresseerumise ja metastaaside tekke aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks, samuti vähivastaste ravimite ja terapeutiliste sekkumiste tõhususe testimiseks prekliinilistes mudelites. Nimelt on B16-F0 rakuliin see rakuliin, millest on saadud teisi variante, nagu B16-F1, B16-F10 ja B16-BL6, selektiivsete menetluste abil, mille eesmärk on suurendada spetsiifilisi metastaatilisi omadusi.

B16-F0 rakkudel on tüüpiline epiteeli morfoloogia ja nad kasvavad kultuuris adherentselt. On teada, et nad ekspresseerivad erinevaid melanoomiga seotud antigeene, mis muudab nad väärtuslikuks vahendiks immunoloogilistes uuringutes ja melanoomi vaktsiinide väljatöötamisel. Lisaks kasutatakse neid rakke sageli geeniekspressiooni, signaaliradasid ja kasvajate mikrokeskkonda käsitlevates uuringutes. Teadlased kasutavad B16-F0 rakke melanoomirakkude ja immuunsüsteemi vaheliste vastastikmõjude uurimiseks, keskendudes eelkõige immuunsüsteemi vältimise ja pärssimise mehhanismidele. B16-F0 ja sellest tuletatud liinide iseloomustamine annab tervikliku raamistiku melanoomi invasiivse ja metastaatilise käitumise mõistmiseks, kusjuures B16-F1, B16-F10 ja B16-BL6 esindavad kõik suureneva metastaatilise ja invasiivse aktiivsuse etappe, olles seega kriitilised mudelid vähi progresseerumise ja ravivastuse uurimisel.

Kude
Nahk
Haigus
Hiire melanoom
Sünonüümid
  • B16/F0
  • B16F0

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Spindli- ja epiteelilaadsete rakkude segu
Rakutüüp
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah, süngeensetel hiirtel

04Tunnused

Viide
B16-F0 (Cytioni katalooginumber 300308)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0604

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Melaniin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6