Pāriet uz saturu
B16-F10-Luc
Audums
Āda
Slimība
Peles melanoma

Dokumenti

B16-F10-Luc

Cell line · Preces numurs 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

B16-F10-Luc ir bioluminiscents atvasinājums no peles melanomas šūnu līnijas B16-F10, kas sākotnēji tika izveidota no spontānas melanomas, kas radās C57BL/6 pelē. Mātes līnija B16-F10 tiek plaši izmantota vēža pētniecībā, pateicoties tās augstajam metastāžu potenciālam un stabilai, reproducējamai implantācijai singēniskos C57BL/6 saimniekos. B16-F10-Luc šūnās luciferāzes gēns ir stabili integrēts konstitutīvi aktīva promotora (parasti EF-1α vai CMV) kontrolē, izmantojot lentivīrusu transdukciju, kā rezultātā tiek nodrošināta augsta līmeņa, stabila luciferāzes ekspresija visās pasāžās.

B16-F10-Luc šūnas izstaro bioluminiscences signālu luciferīna substrāta klātbūtnē, ļaujot veikt neinvazīvu, kvantitatīvu in vivo bioluminiscences attēlveidošanu (BLI) audzēja augšanai, izplatībai un metastāzēm dzīvos dzīvniekos. Šī līnija ir piemērota gan subkutāniem, gan intravenozajiem (eksperimentālās metastāzes) modeļiem C57BL/6 pelēm, metastātiskajām kolonijām veidojoties galvenokārt plaušās. Luminescences intensitāte ir lineāri proporcionāla dzīvotspējīgo šūnu skaitam, ļaujot reāllaikā un gareniski uzraudzīt audzēja apjomu, neupurējot dzīvniekus katrā laika punktā. Luciferāzes ekspresija būtiski nemaina B16-F10 šūnu augšanas kinētiku in vitro vai in vivo.

Galvenās lietošanas jomas ietver pretvēža līdzekļu, imūnterapiju un metastāžu inhibējošu savienojumu novērtēšanu singēniskos modeļos, kā arī kvantitatīvo farmakodinamisko attēlveidošanu pirmsklīniskajos onkoloģijas pētījumos.

Audums
Āda
Slimība
Peles melanoma

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Vārpveida un epitēlijveidīgu šūnu maisījums

04Identifikatori

Atsauce
B16-F10-Luc (Cytion kataloga numurs 305658)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
Produkti
Melanīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6