Премини към съдържанието
B16-F10-Luc
Тъкан
Кожа
Заболяване
Меланом на мишка

Документи

B16-F10-Luc

Cell line · Номер на продукта 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

B16-F10-Luc е биолуминесцентен вариант на мишия меланомни клетъчен линия B16-F10, която първоначално е била създадена от спонтанен меланом, възникнал при мишка от линия C57BL/6. Родителската линия B16-F10 се използва широко в изследванията на рака благодарение на високия си метастатичен потенциал и стабилното, възпроизводимо присаждане в сингенени приемници от линия C57BL/6. В клетките B16-F10-Luc генът на луциферазата е стабилно интегриран под контрола на конститутивно активен промотор (обикновено EF-1α или CMV) чрез лентивирусна трансдукция, което води до високо ниво на стабилна експресия на луциферазата през всички пасажи.

Клетките B16-F10-Luc излъчват биолуминесцентен сигнал в присъствието на субстрат луциферин, което позволява неинвазивно, количествено in vivo биолуминесцентно изображение (BLI) на туморния растеж, разпространението и метастазите при живи животни. Линията е подходяща както за подкожни, така и за интравенозни (експериментални метастази) модели при мишки C57BL/6, като метастатичните колонии се образуват предимно в белите дробове. Луминесцентният изход е линейно пропорционален на броя на жизнеспособните клетки, което позволява наблюдение в реално време и в дългосрочен план на туморното натоварване, без да се налага жертването на животни във всеки момент. Експресията на луциферазата не променя значително кинетиката на растежа in vitro или in vivo на клетките B16-F10.

Основните приложения включват оценка на антитуморни средства, имунотерапии и съединения, инхибиращи метастазите, в сингенни модели, както и количествено фармакодинамично изобразяване в предклинични онкологични проучвания.

Тъкан
Кожа
Заболяване
Меланом на мишка

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Смес от вретеновидни и епителни клетки

04Идентификатори

Източник
B16-F10-Luc (каталожен номер на Cytion 305658)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_C8XU

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
Luc2 (светулка, с оптимизирани кодони)
Продукти
Меланин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 до 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контрол на качеството и криоконсервация

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна хранителна среда + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
C57BL/6