Перейти до вмісту
B16-F10-Luc
Тканина
Шкіра
Хвороба
Меланома миші

Документи

B16-F10-Luc

Cell line · Номер товару 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

B16-F10-Luc — це біолюмінесцентний варіант клітинної лінії мишачої меланоми B16-F10, яка була спочатку отримана зі спонтанної меланоми, що виникла у миші C57BL/6. Базова лінія B16-F10 широко використовується в онкологічних дослідженнях завдяки високому метастатичному потенціалу та надійному, відтворюваному приживленню в сингенних реципієнтах C57BL/6. У клітинах B16-F10-Luc ген люциферази був стабільно інтегрований під контролем конститутивно активного промотора (зазвичай EF-1α або CMV) шляхом лентивірусної трансдукції, що призвело до високого рівня стабільної експресії люциферази протягом усіх пасажів.

Клітини B16-F10-Luc випромінюють біолюмінесцентний сигнал у присутності субстрату люциферину, що дозволяє проводити неінвазивну кількісну біолюмінесцентну візуалізацію (BLI) in vivo росту пухлини, її поширення та метастазування у живих тварин. Ця лінія підходить як для підшкірних, так і для внутрішньовенних (експериментальні метастази) моделей на мишах C57BL/6, причому метастатичні колонії переважно утворюються в легенях. Інтенсивність люмінесценції лінійно пропорційна кількості життєздатних клітин, що дозволяє здійснювати подовжене спостереження за пухлинним навантаженням у реальному часі без необхідності забивання тварин у кожній часовій точці. Експресія люциферази не змінює істотно кінетику росту клітин B16-F10 in vitro або in vivo.

Основні сфери застосування включають оцінку протипухлинних препаратів, імунотерапії та сполук, що інгібують метастазування, у сингенних моделях, а також кількісну фармакодинамічну візуалізацію в доклінічних онкологічних дослідженнях.

Тканина
Шкіра
Хвороба
Меланома миші

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Суміш веретеноподібних та епітеліоподібних клітин

04Ідентифікатори

Посилання
B16-F10-Luc (номер у каталозі Cytion 305658)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_C8XU

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
Luc2 (світлячок, з оптимізованими кодонами)
Продукція
Меланін

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Від 1 до 3 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контроль якості та кріоконсервація

Середовище для заморожування
В якості середовища для кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після розморожування.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C57BL/6